Anticorpo monoclonale coniugato coniugato Anti-JNK1/JNK3 di coniglio per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P45983 / P53779

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di JNK1/JNK3

• La proteina chinasi 8 attivata da mitogeni (MAPK8), nota anche come JNK1, è una serina/treonina chinasi che agisce come componente centrale della via di segnalazione della proteina chinasi attivata dallo stress/c-Jun N-terminale (SAP/JNK), attivata da stress extracellulari e citochine pro-infiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:28943315
• Dopo l'attivazione, JNK1 fosforila e regola i fattori di trascrizione AP-1 come JUN, JDP2 e ATF2, controllando così i programmi di espressione genica coinvolti nella proliferazione, differenziazione e sopravvivenza cellulare. Riferimenti correlati: PMID:18307971
• In risposta allo stress, JNK1 promuove l'apoptosi fosforilando regolatori critici come p53/TP53 e la proteina Yes-associata YAP1, e media la fosforilazione di BAD per la sopravvivenza delle cellule eritroidi, nonché la fosforilazione di BCL2 indotta dal digiuno che innesca l'autofagia. Riferimenti correlati: PMID:21364637, PMID:21095239, PMID:18570871
• JNK1 fosforila l'eterodimero CLOCK-BMAL1, svolgendo un ruolo diretto nella regolazione dell'orologio circadiano. Riferimenti correlati: PMID:22441692
• Una funzione pro-infiammatoria chiave coinvolge la fosforilazione di NLRP3, che promuove l'assemblaggio dell'inflammasoma NLRP3. Riferimenti correlati: PMID:28943315
• Sotto stress ossidativo, JNK1 mira a diversi substrati tra cui EIF4ENIF1 per l'assemblaggio dei corpi P, SIRT6 per stimolare la sua attività mono-ADP-ribosiltransferasica e ALKBH5 per aumentarne la SUMOilazione e inattivazione. Riferimenti correlati: PMID:22966201, PMID:27568560, PMID:34048572
• JNK1 si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nella sinapsi, e lo splicing alternativo produce multiple isoforme (alfa-1, alfa-2, beta-1, beta-2) con proprietà di legame al substrato distinte, che modulano finemente gli eventi di segnalazione a valle.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre la regione N-terminale (aa 1–383) di JNK1, che può rilevare multiple isoforme e sia le forme fosforilate che non fosforilate; tuttavia, gli spostamenti di mobilità dipendenti dall'attivazione e la presenza di reattività crociata con JNK3 dovrebbero essere considerati nell'interpretazione dei pattern delle bande.
• Per il Western blot, aspettarsi bande intorno a 46–48 kDa, con possibili segnali aggiuntivi più bassi che riflettono isoforme o prodotti di degradazione; includere controlli positivi e negativi appropriati (ad es., lisati che esprimono JNK2 vs. lisati carenti di JNK2) per confermare la specificità.
• In IHC-P e IF/ICC, possono essere applicati protocolli standard di fissazione e recupero dell'antigene; tuttavia, le condizioni ottimali dovrebbero essere determinate empiricamente per ogni tipo di tessuto o cellula, e l'assenza di reattività crociata con JNK2 può essere sfruttata per distinguere la localizzazione specifica di JNK1/3.
• Poiché l'anticorpo non riconosce JNK2, è ben adatto per esperimenti in cui è richiesta la discriminazione tra JNK1/3 e JNK2, come negli studi di knockdown o sovraespressione paralleli.
• Considerare la stimolazione delle cellule con anisomicina o trattamento UV per indurre l'attivazione di JNK e validare la capacità dell'anticorpo di rilevare i cambiamenti di segnalazione indotti dallo stress.

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