Anticorpo policlonale anti-Kaiso/ZBTB33 - Q86T24

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di Kaiso/ZBTB33

• Il regolatore trascrizionale Kaiso (ZBTB33/ZNF348) funge da proteina bimodale legante il DNA, riconoscendo i dinucleotidi CpG metilati (5'-CGCG-3') e il sito di legame Kaiso non metilato (5'-CTGCNA-3').
• Recluta il complesso corepressore N-CoR nei promotori dei geni bersaglio, promuovendo la deacetilazione degli istoni e la formazione di cromatina repressiva, regolando così negativamente i geni della via di segnalazione Wnt.
• Può anche agire come attivatore trascrizionale per un sottoinsieme di geni bersaglio tramite il reclutamento di CTNND2 (catenina delta-2), dimostrando ruoli regolatori dipendenti dal contesto.
• Reprime l'espressione della metalloproteinasi della matrice 7 (MMP7) attraverso interazioni con i corepressori CBFA2T3, CBFA2T2 e RUNX1T1, come dimostrato in studi funzionali (PubMed:23251453). Riferimenti correlati: PMID:23251453
• È localizzato a livello subcellulare sia nel nucleo sia nel citoplasma, in accordo con i suoi ruoli nella regolazione trascrizionale e con il potenziale trasferimento tra i due compartimenti.
• È espresso in modo specifico nei tessuti dell'endotelio vascolare, suggerendo un ruolo nella funzione delle cellule endoteliali.
• Contiene un dominio BTB/POZ e molteplici dita di zinco di tipo C2H2, che mediano le interazioni proteiche e il legame al DNA specifico per sequenza; è classificato come metalloproteina e fosfoproteina.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 523-672) di Kaiso umano, che contiene domini a dita di zinco; questa regione è ben conservata nell'uomo, nel topo e nel ratto, in accordo con la reattività crociata riportata. Per le applicazioni quantitative, validare la specificità dell'anticorpo nel sistema campione di interesse.
• Per il Western blotting, è prevista una banda intorno a 74 kDa. Includere, se disponibili, controlli positivi costituiti da lisati cellulari umani, murini o di ratto; considerare che l'espressione endogena può variare in base al tessuto o al tipo cellulare.
• Nell'immunoprecipitazione della cromatina (ChIP), ottimizzare le condizioni di fissazione e frammentazione della cromatina, poiché Kaiso si lega al DNA metilato; l'anticorpo può essere adatto sia per ChIP-qPCR sia per ChIP-seq, ma è necessario confermare il legame nel proprio sistema.
• Per l'ELISA, utilizzare l'immunogeno ricombinante come standard per stabilire le condizioni del saggio; si noti che la natura policlonale può richiedere un'attenta ottimizzazione degli anticorpi di rivestimento e di rilevazione.

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