Anticorpo monoclonale di coniglio anti-callicreina 10 (NES1/PRSSL1) per WB, IF/ICC, ELISA - O43240

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della callicreina 10

• La callicreina-10 (KLK10), nota anche come normal epithelial cell-specific 1 (NES1) e protease serine-like 1 (PRSSL1), è una serina proteasi secreta della famiglia delle callicreine.
• Funziona come soppressore tumorale nel carcinoma mammario e prostatico, inibendo la proliferazione cellulare e promuovendo l'apoptosi.
• La proteina è espressa principalmente nei tessuti ghiandolari, inclusi mammella, ovaio e prostata, dove svolge un ruolo nell'omeostasi delle cellule epiteliali.
• A livello subcellulare, KLK10 viene secreta nello spazio extracellulare, in accordo con il suo ruolo di idrolasi serinica coinvolta nelle cascate proteolitiche.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione legata all'azoto e la formazione di ponti disolfuro, fondamentali per la stabilità strutturale e l'attività enzimatica.
• La proteina è coinvolta nella regolazione del ciclo cellulare e la sua espressione è spesso ridotta nei tessuti maligni, evidenziandone le proprietà di soppressione tumorale.
• In quanto serina proteasi, KLK10 può partecipare all'attivazione degli zimogeni e al rimodellamento della matrice extracellulare, sebbene i suoi specifici substrati naturali siano ancora oggetto di studio.
• La parola chiave UniProt "3D-structure" indica che la sua struttura tridimensionale è stata determinata, il che può agevolare la progettazione di anticorpi e gli studi funzionali.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo corrisponde agli amminoacidi 43-276 della KLK10 umana (NP_665895.1), comprendendo un'ampia porzione del dominio proteasico extracellulare; pertanto, è probabile che l'anticorpo riconosca la proteina secreta matura.
• Per le applicazioni di Western blot (WB), si consiglia di considerare un intervallo di diluizione compreso tra 1:500 e 1:2000 e di validare il test con un controllo positivo, come la proteina KLK10 ricombinante o lisati cellulari di linee tumorali mammarie, ovariche o prostatiche che esprimono KLK10.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), ottimizzare le fasi di permeabilizzazione e blocco; si noti che KLK10 è secreta, pertanto la fissazione può richiedere condizioni specifiche per conservare la proteina nello spazio pericellulare.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come anticorpo di cattura o di rilevazione; tuttavia, per lo sviluppo di un ELISA a sandwich si raccomanda l'abbinamento con un altro clone diretto contro un epitopo distinto. Validare con l'antigene purificato o con campioni clinici per valutarne le prestazioni.
• In quanto anticorpo monoclonale di coniglio, offre un'elevata coerenza e specificità tra i diversi lotti, risultando adatto per studi a lungo termine o per lo sviluppo di test diagnostici.

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