Anticorpo policlonale anti-KAT7 di coniglio per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O95251

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di KAT7

• L'istone acetiltransferasi KAT7 (nota anche come HBO1, HBOa, MYST2) catalizza l'acetilazione dell'istone H3 alla Lisi-14 (H3K14ac) e dell'istone H4 alla Lisi-5, Lisi-8 e Lisi-12 (H4K5ac, H4K8ac, H4K12ac). H3K14ac regola la trascrizione genica, la regolazione immunitaria, il mantenimento delle cellule staminali e lo sviluppo embrionale; l'acetilazione di H4 promuove la licenza di replicazione del DNA facilitando il caricamento cromatinico dei complessi MCM. Riferimenti correlati: PMID:16387653 PMID:21753189 PMID:24065767 PMID:10438470 PMID:19187766 PMID:20129055 PMID:11278932 PMID:18832067
• L'H3K14ac mediata da KAT7 migliora la processività della RNA polimerasi II durante la trascrizione ed è cruciale per mantenere l'espressione elevata di HOXA9 e HOXA10 nelle cellule staminali della leucemia mieloide acuta, supportando la sopravvivenza delle cellule leucemiche. Riferimenti correlati: PMID:31827282
• Nell'ematopoiesi, KAT7 forma un complesso con BRD1/BRPF2 per dirigere l'H3K14ac, essenziale per la differenziazione eritroide; l'H3K14ac è richiesta anche per lo sviluppo delle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:21753189
• KAT7 si localizza ai centromeri, dove media l'acetilazione degli istoni per prevenire l'inattivazione del centromero mediata da SUV39H1 e agisce come regolatore positivo dell'assemblaggio di CENPA, garantendo l'identità del centromero. Riferimenti correlati: PMID:27270040
• In seguito a danni al DNA, KAT7 viene fosforilata da ATR e reclutata alle lesioni indotte da UV, facilitando l'acetilazione degli istoni e il reclutamento di XPC per un'efficiente riparazione per escissione dei nucleotidi. Riferimenti correlati: PMID:28719581
• KAT7 inibisce la segnalazione NF-kappa-B indipendentemente dalla sua attività acetiltransferasica, fornendo una funzione regolatoria non catalitica nelle risposte immunitarie e infiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:16997280
• A livello subcellulare, KAT7 è prevalentemente nucleare, con arricchimento ai cromosomi e ai centromeri; viene rilevata anche nel citosol, suggerendo una localizzazione dinamica.
• KAT7 è espressa ubiquitariamente, con livelli più elevati nei testicoli, indicando un ruolo ampio ma specializzato in diversi tessuti.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 55–193, una regione N-terminale; si consiglia di validare la specificità dell'anticorpo confrontando i segnali in lisati di cellule di tipo selvaggio rispetto a cellule con knock-down di KAT7.
• Per il Western blot, prevedere una banda vicino a 71 kDa; ottimizzare il blocco (es. 5% latte scremato) e i controlli di carico, e titolare la diluizione dell'anticorpo per il proprio sistema di campioni.
• In IHC-P, il recupero dell'antigene (es. recupero dell'epitopo indotto dal calore in tampone citrato) potrebbe essere necessario; utilizzare sezioni di testicolo come controllo positivo a causa dell'alta espressione di KAT7.
• Per IF/ICC, fissare e permeabilizzare le cellule in modo appropriato; la colorazione nucleare e centromerica di KAT7 può essere confermata con un controcolorazione del DNA (es. DAPI).
• Le analisi ELISA possono utilizzare l'immunogeno ricombinante come standard per determinare la concentrazione di rivestimento ottimale e il titolo dell'anticorpo; la reattività crociata con gli ortologhi di mouse e ratto consente lo sviluppo di saggi multi-specie.

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