Anticorpo policlonale coniglio anti-KATNB1 per WB, IF/ICC, ELISA - Q9BVA0

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di KATNB1

• KATNB1 codifica la subunità regolatoria p80 del complesso katanina, un'AAA ATPasi che taglia i microtubuli in modo dipendente dall'ATP.
• La subunità p80 indirizza la subunità enzimatica p60 verso siti subcellulari specifici, inclusi il centrosoma e i poli del fuso mitotico, consentendo la scissione localizzata dei microtubuli.
• La scissione dei microtubuli da parte della katanina promuove una rapida riorganizzazione del citoscheletro, facilita il rilascio dei microtubuli dai siti di nucleazione e contribuisce al flusso dei microtubuli verso i poli e al movimento dei cromosomi durante la mitosi.
• Nei neuroni, il rilascio dei microtubuli mediato da KATNB1 è necessario per il trasporto dei microtubuli nei processi in sviluppo, essenziale per la crescita assonale.
• La localizzazione subcellulare è principalmente citoplasmatica, con arricchimento al centrosoma, ai poli del fuso e in tutto il citoscheletro.
• Le mutazioni in KATNB1 sono associate alla lissencefalia (LIS6), una malformazione cerebrale, evidenziando il suo ruolo critico nello sviluppo corticale.
• La proteina presenta domini di ripetizione WD40 multipli, che probabilmente mediano le interazioni proteina-proteina all'interno del complesso katanina e con altri regolatori.
• KATNB1 è soggetta a fosforilazione, che può modulare la sua attività; il suo peso molecolare apparente è di circa 72 kDa.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, considerare l'uso di lisati cellulari totali da linee cellulari umane, murine o di ratto; prevedere una banda principale vicino a 72 kDa corrispondente al KATNB1 a lunghezza intera.
• In IF/ICC, i protocolli di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzati per preservare la colorazione del centrosoma e dei poli del fuso; è raccomandata la colorazione simultanea con un marcatore del centrosoma (es. γ-tubulina) per la validazione.
• La sequenza immunogenica (aa 400–500) si trova nella regione C-terminale, quindi l'anticorpo potrebbe riconoscere sia la proteina a lunghezza intera che potenziali varianti di splicing o prodotti di degradazione.
• La reattività crociata con topo e ratto rende questo anticorpo adatto alla validazione in modelli traslazionali; confermare la specificità nel tessuto o contesto cellulare pertinente utilizzando controlli di knockdown.

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