Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-KDM1 (LSD1) per WB, IHC-P - O60341

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di KDM1A

• KDM1A (nota anche come LSD1, AOF2, BHC110) è una istone demetilasi lisina-specifica FAD-dipendente che rimuove i segni mono- e dimetilici dall'istone H3 alla lisina 4 (H3K4me1/me2) e alla lisina 9 (H3K9me1/me2). A seconda del contesto del promotore, questa attività può portare alla repressione o all'attivazione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:15620353, PMID:15811342, PMID:16079794
• La demetilazione di H3K4me sui nucleosomi richiede l'interazione con il co-repressore RCOR1/CoREST, collegando KDM1A alla regolazione dell'espressione genica neuronale e alla funzione del complesso REST. Riferimenti correlati: PMID:16079794, PMID:16140033, PMID:16885027
• In presenza del recettore degli androgeni (AR), KDM1A agisce come un coattivatore demetilando H3K9me, e questa funzione è modulata dalla fosforilazione della treonina 6 dell'istone H3 (H3T6ph) da parte di PRKCB. Riferimenti correlati: PMID:16079795
• KDM1A demetila anche substrati non-istonici, inclusa la lisina 370 di p53 (compromettendo la sua interazione con 53BP1), la DNA metiltransferasi 1 (DNMT1) e il fattore di trascrizione SOX2, influenzando così la stabilità e la funzione proteica. Riferimenti correlati: PMID:29691401, PMID:29358331
• Svolge un ruolo cruciale nello sviluppo, essendo necessaria per la gastrulazione, e nell'ematopoiesi dove agisce all'interno di un complesso RCOR/GFI/KDM1A/HDAC per regolare la differenziazione delle cellule del sangue. Riferimenti correlati: PMID:16079794, PMID:16140033
• KDM1A facilita la transizione epitelio-mesenchimale (EMT) cooperando con SNAI1 per reprimere marcatori epiteliali come E-caderina/CDH1, CDN7 e KRT8. Riferimenti correlati: PMID:20562920, PMID:27292636, PMID:20389281
• Nei neuroni, un isoforma di KDM1A arricchita nel cervello demetila l'istone H4 lisina 20 (H4K20me1/me2) per regolare l'espressione genica dipendente dall'attività, un processo essenziale per l'apprendimento spaziale e la memoria. Riferimenti correlati: PMID:26214369
• KDM1A è localizzata prevalentemente nel nucleo ed è espressa in modo ubiquitario, con un'espressione particolarmente elevata nel cervello e nei testicoli.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per l'analisi Western blot, il peso molecolare previsto di KDM1A è di circa 93 kDa; si consiglia di utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e verificare la specificità della banda con controlli di knockdown o knockout.
• L'immunogeno corrisponde ai residui 130–380 di KDM1A umana; eseguire un allineamento di sequenze per valutare l'omologia del bersaglio quando si utilizzano campioni di topo o ratto, poiché la reattività crociata è indicata ma può variare in base all'applicazione.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), sezioni tissutali di cervello o testicolo possono servire come controlli positivi data l'elevata espressione di KDM1A; ottimizzare il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo primario empiricamente.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), aspettarsi una colorazione nucleare; una corretta fissazione e permeabilizzazione cellulare sono critiche, ed è consigliata una co-colorazione con un marcatore nucleare.
• Quando utilizzato in ELISA, l'inclusione di controlli positivi e negativi è essenziale per valutare la specificità e la linearità dell'anticorpo.

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