Anticorpo monoclonale di coniglio anti-KDM1/LSD1 per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - O60341

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di KDM1/LSD1

• KDM1/LSD1 (Lisina-specifica istone demetilasi 1A), anche designata BHC110 o AOF2, è un'ammina ossidasi dipendente da FAD appartenente alla famiglia delle monoammina ossidasi flaviniche.
• Demetila specificamente la lisina 4 (H3K4me1/2) e la lisina 9 (H3K9me1/2) mono- e dimetilate sull'istone H3, permettendole di agire come coattivatore o corepressore trascrizionale a seconda del contesto cellulare. Riferimenti correlati: PMID:15620353, PMID:15811342, PMID:16079794
• La demetilazione nucleosomica efficiente richiede il corepressore RCOR1/CoREST, e la demetilazione H3K4 mediata da LSD1 è essenziale per la repressione dei geni specifici dei neuroni. Riferimenti correlati: PMID:16079794, PMID:16140033, PMID:16885027
• In presenza del recettore degli androgeni (AR), LSD1 passa a un ruolo di coattivatore demetilando H3K9me, una modifica inibita dalla fosforilazione mediata da PRKCB dell'istone H3 a Thr6. Riferimenti correlati: PMID:16079795
• LSD1 contribuisce alla transizione epiteliale-mesenchimale (EMT) agendo come effettore a valle di SNAI1, reprimendo marcatori epiteliali come E-caderina/CDH1. Riferimenti correlati: PMID:20562920, PMID:27292636
• Oltre agli istoni, LSD1 demetila substrati non istonici tra cui DNMT1 e SOX2, modulando la metilazione del DNA e la pluripotenza delle cellule staminali. Riferimenti correlati: PMID:29691401, PMID:29358331
• LSD1 è espressa ubiquitariamente, con un'espressione notevolmente elevata nel cervello e nei testicoli, dove una isoforma specifica dei neuroni demetila H4K20me1/2, una funzione essenziale per l'espressione genica dipendente dall'attività neuronale. Riferimenti correlati: PMID:26214369
• A livello subcellulare, LSD1 si localizza prevalentemente nel nucleo associata alla cromatina; è annotata con parole chiave tra cui regolatore della cromatina, regolazione della trascrizione e proteina dello sviluppo.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 170–275) può essere conservato tra le specie, coerente con la reattività crociata riportata verso umano, topo, ratto e scimmia; verificare l'omologia della sequenza bersaglio nel sistema modello utilizzato.
• Per il Western blot, prevedere una banda a circa 93 kDa; considerare protocolli di estrazione nucleare per arricchire il segnale e utilizzare controlli di carico appropriati.
• Nelle saggie di immunofluorescenza e immunochimica, ottimizzare le condizioni di fissaggio e permeabilizzazione, poiché LSD1 è una proteina nucleare; validare la specificità della colorazione con controlli pertinenti.
• Per l'ELISA, eseguire titrazioni a scacchiera standard per determinare le concentrazioni ottimali dell'antigene di rivestimento e dell'anticorpo per il formato di piastra specifico.

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