Anticorpo policlonale di coniglio anti-KDM2A per WB, ELISA - Q9Y2K7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di KDM2A

• KDM2A (nota anche come FBXL11, JHDM1A, CXXC8) è un membro della famiglia delle demetilasi degli istoni contenenti il dominio JmjC e una proteina F-box contenente ripetizioni ricche di leucina.
• Demetila specificamente la 'Lys-36' dell'istone H3 (H3K36me2), con una preferenza per la H3K36 dimetilata rispetto alle forme monometilata e trimetilata, svolgendo un ruolo centrale nella dinamica del codice degli istoni.
• KDM2A è necessaria per mantenere lo stato eterocromatico; si associa ai centromeri e reprime la trascrizione di piccoli RNA non codificanti codificati da ripetizioni satelliti, sostenendo così l'integrità centromerica e la stabilità genomica, in particolare durante la mitosi.
• Regola l'espressione dei geni circadiani reprimendo, in modo indipendente dall'attività catalitica, l'attività dell'attivatore trascrizionale dell'eterodimero CLOCK-BMAL1 e di RORA. Riferimenti correlati: PMID:26037310
• A livello subcellulare, KDM2A si localizza nel nucleoplasma e si associa ai cromosomi, in particolare alle regioni centromeriche.
• Specificità tissutale: ampiamente espressa, con i livelli più elevati nel cervello, nei testicoli e nelle ovaie, seguiti dai polmoni.
• KDM2A contiene un dominio a dito di zinco di tipo CXXC per il legame al DNA e un dominio JmjC per l'attività demetilasica. È soggetta a modificazioni post-traduzionali quali ADP-ribosilazione e fosforilazione e partecipa a una via di coniugazione dell'ubiquitina in quanto proteina F-box.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per questo anticorpo corrisponde a un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 1-100 della KDM2A umana (regione N-terminale), conservato nel topo. Ciò suggerisce che l'anticorpo possa riconoscere la KDM2A sia umana sia murina.
• Per il Western blot, per la KDM2A a lunghezza intera è attesa una banda specifica a circa 133 kDa. A causa dello splicing alternativo, possono essere rilevate più isoforme; validare utilizzando i lisati di controllo appropriati.
• Si consiglia di utilizzare lisati arricchiti in frazione nucleare provenienti da tessuti umani o murini con elevata espressione di KDM2A (ad es. cervello, testicoli, ovaie) per aumentare il segnale.
• Essendo un anticorpo policlonale, può presentare variabilità tra diversi lotti; eseguire sempre una validazione iniziale con il proprio sistema sperimentale.
• Per l'ELISA, l'anticorpo è adatto per la rilevazione di KDM2A ricombinante o di antigeni peptidici; ottimizzare le condizioni di adsorbimento e rilevazione.

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