Anticorpo monoclonale di coniglio anti-KDM4A per WB, IP, ELISA - O75164

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di KDM4A

• La demetilasi 4A specifica per la lisina (KDM4A), nota anche come JMJD2A o JHDM3A, è una demetilasi istonica che demetila specificamente i residui trimetilati 'Lys-9' (H3K9me3) e 'Lys-36' (H3K36me3) dell'istone H3, senza attività sui residui mono- o dimetilati né su H3K4, H3K27 o H4K20. Demetila inoltre l'istone H1.4 in corrispondenza di 'Lys-26' (H1.4K26me1/me2/me3).
  Riferimenti correlati: PMID:16603238, PMID:26741168, PMID:21768309, PMID:19144645, PMID:30156264
• KDM4A partecipa alla repressione trascrizionale reclutando le deacetilasi degli istoni (HDAC) e il corepressore NCOR1 nei promotori responsivi a E2F e nei promotori di ASCL2.
  Riferimenti correlati: PMID:16024779
• Un'isoforma muscolo-specifica di KDM4A priva del dominio demetilasico N-terminale è essenziale per la differenziazione muscolare; attiva la trascrizione del gene Myog rimuovendo i marcatori repressivi della cromatina.
• KDM4A è localizzata nel nucleo.
• KDM4A è espressa ubiquitariamente nei tessuti umani.
• La proteina appartiene alla famiglia delle demetilasi istoniche contenenti il dominio JmjC e contiene domini zinc-finger. È soggetta ad acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, e la sua attività coinvolge ferro e zinco come cofattori.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde ai residui 382-459 della KDM4A umana, localizzati nella regione N-terminale. Verificare che l'anticorpo rilevi sia le isoforme a lunghezza intera sia le isoforme muscolo-specifiche prive del dominio N-terminale, effettuando test su lisati cellulari pertinenti (ad es., mioblasti rispetto a miotubi).
• Per il Western blot, per la KDM4A a lunghezza intera è prevista una banda a circa 121 kDa; validare utilizzando estratti nucleari di linee cellulari umane, murine o di ratto.
• Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo per ciascuna applicazione (WB, IP, ELISA) utilizzando campioni di controllo positivi; eseguire esperimenti di titolazione per determinare la concentrazione di lavoro ottimale.
• Per l'immunoprecipitazione, considerare metodi di cross-linking o protocolli diretti in base all'isotipo dell'anticorpo e all'abbondanza del target.
• Includere controlli appropriati (ad es., controllo isotipico, lisati knockout) per confermare la specificità.

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