Anticorpo Monoclonale Anti-KDM4B/JMJD2B di Coniglio per WB, IF/ICC, IP, ELISA, ChIP - O94953

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di KDM4B

• KDM4B, noto anche come JMJD2B o JHDM3B, è una demetilasi lisina-specifica 4B e un membro della famiglia delle demetilasi istoniche contenenti il dominio Jumonji C (JmjC) (gene KDM4B/JMJD2B). È un enzima modificatore della cromatina che regola la trascrizione rimuovendo gruppi metilici dagli istoni.
• Demetila specificamente l'istone H3 lisina 9 trimetilato (H3K9me3), producendo formaldeide e succinato nel processo. Non agisce su H3K4, H3K27, H3K36 o H4K20. Rispetto ad altri membri della famiglia KDM4 (KDM4A, KDM4C, KDM4D), KDM4B ha un'attività catalitica più debole verso H3K9me3. Riferimenti correlati: PMID:16603238 PMID:28262558
• Svolge un ruolo critico nello sviluppo del sistema nervoso centrale (SNC), come evidenziato dalla sua implicazione nelle funzioni neurologiche e nelle associazioni con malattie.
• Si localizza prevalentemente nel nucleo, in linea con la sua funzione nella modifica istonica e nella regolazione della cromatina.
• Contiene molteplici domini conservati tra cui JmjC, JmjN, dita di zinco di tipo PHD e domini TUDOR, coinvolti nel legame alla cromatina e nell'attività catalitica. Richiede ferro e zinco come cofattori per la sua attività diossigenasica.
• Soggetto a modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione e fosforilazione, che possono regolarne l'attività o le interazioni. Lo splicing alternativo genera più isoforme.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 50-150 all'interno della regione N-terminale di KDM4B umano. Questa regione è distinta dal dominio catalitico JmjC, e l'anticorpo può riconoscere più isoforme che includono questa sequenza N-terminale.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda vicino a 122 kDa. Validare la specificità utilizzando lisati di controllo positivi e negativi appropriati, e considerare la possibilità di rilevare varianti di splicing alternative.
• Per l'immunoprecipitazione (IP) e l'immunoprecipitazione della cromatina (ChIP), eseguire esperimenti pilota per ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo e le condizioni di crosslinking. Utilizzare controlli isotipo IgG e validare l'arricchimento in loci target noti di KDM4B.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), verificare la localizzazione nucleare; l'anticorpo dovrebbe colorare prevalentemente il nucleo. La co-colorazione con marcatori nucleari può confermare la specificità.
• La reattività incrociata è riportata per umano, topo e ratto. Per altre specie, confermare l'omologia di sequenza all'interno della regione immunogena prima dell'uso.

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