Anticorpo policlonale anti-KDM5A per WB, IP, ELISA, ChIP - P29375

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di KDM5A

• La demetilasi specifica della lisina 5A (KDM5A), nota anche come JARID1A, RBBP-2 o RBP2, è una demetilasi delle istone che rimuove specificamente i gruppi metilici dalla lisina 4 trimetilata e dimetilata dell'istone H3 (H3K4), svolgendo un ruolo fondamentale nella regolazione della cromatina e nella trascrizione genica.
• KDM5A demetila specificamente H3K4me3 e H3K4me2 ma non H3K4 monometilata, né altri residui di lisina delle istone (H3K9, H3K27, H3K36, H3K79, H4K20), contribuendo così alla dinamica del codice delle istone.
• Regola la trascrizione genica legandosi direttamente al DNA nel motivo 5'-CCGCCC-3', influenzando l'espressione dei geni bersaglio a valle. Riferimenti correlati: PMID:18270511
• KDM5A è coinvolta nel controllo trascrizionale delle proteine Hox durante la differenziazione cellulare e può reprimere citochine come CXCL12, nonché regolare il ritmo circadiano attraverso una funzione di coattivatore indipendente dalla demetilasi con CLOCK-BMAL1. Riferimenti correlati: PMID:19430464
• La proteina si localizza nel nucleo e nel nucleolo, coerentemente con il suo ruolo nella modifica della cromatina e nella regolazione della trascrizione.
• È stato riportato che KDM5A agisce come corepressore trascrizionale per alcuni geni (es. MT1F) e favorisce la proliferazione delle cellule tumorali, evidenziando la sua potenziale significatività in oncologia. Riferimenti correlati: PMID:27427228
• Come proteina contenente il dominio Jumonji/ARID, KDM5A appartiene alla famiglia JARID di demetilasi delle istone, caratterizzate dalla loro attività ossigenasica che richiede ferro e 2-ossoglutarato.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot (WB), dato l'elevato peso molecolare di KDM5A (~192 kDa), utilizzare gel di acrilamide a bassa percentuale e garantire un trasferimento proteico completo con tamponi appropriati e tempi di trasferimento estesi.
• Nell'immunoprecipitazione (IP), la natura policlonale di questo anticorpo può aumentare l'efficienza di cattura, ma includere controlli di isotipo e convalidare il recupero mediante rilevamento specifico del bersaglio.
• Per l'immunoprecipitazione della cromatina (ChIP), si prevede che questo anticorpo funzioni sulla base dell'immunogeno ricombinante a lunghezza intera; tuttavia, è consigliabile titolare l'anticorpo e confermare l'arricchimento di promotori bersaglio noti di KDM5A nel proprio sistema sperimentale.
• Le applicazioni ELISA potrebbero richiedere l'ottimizzazione dell'antigene di rivestimento e della diluizione dell'anticorpo; considerare l'utilizzo dell'immunogeno ricombinante come controllo positivo.

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