Anticorpo policlonale di coniglio anti-KEAP1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14145

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di KEAP1

• KEAP1 (proteina 1 associata a ECH simile a Kelch), indicata anche come INrf2 o KLHL19, è una proteina citoplasmatica e nucleare di 70 kDa che funge da adattatore specifico per il substrato del complesso E3 della ubiquitina ligasi BCR (BTB-CUL3-RBX1).
• In condizioni basali, KEAP1 indirizza il fattore di trascrizione NFE2L2/NRF2 verso l'ubiquitinazione e la degradazione proteasomica, reprimendo così l'espressione dei geni citoprotettivi. Riferimenti correlati: PMID:14585973 PMID:15379550 PMID:15572695 PMID:15601839 PMID:16006525
• In qualità di sensore chiave dello stress ossidativo, KEAP1 contiene residui di cisteina altamente reattivi che subiscono modificazioni covalenti non enzimatiche da parte di elettrofili, determinando l'inattivazione del complesso ligasi e il successivo accumulo nucleare di NRF2. Riferimenti correlati: PMID:16006525 PMID:17127771 PMID:18251510
• KEAP1 partecipa inoltre all'autofagia selettiva interagendo con SQSTM1/p62; ciò sequestra KEAP1 nei corpi inclusi, attivando ulteriormente NRF2 e mediando simultaneamente l'ubiquitinazione e la degradazione di SQSTM1/p62. Riferimenti correlati: PMID:20452972 PMID:28380357
• Tra i substrati aggiuntivi del complesso della ubiquitina ligasi contenente KEAP1 figurano BPTF e PGAM5, evidenziandone gli ampi ruoli regolatori. Riferimenti correlati: PMID:15379550 PMID:17046835
• KEAP1 è ampiamente espressa nei tessuti umani, con i livelli più elevati riscontrati nel muscolo scheletrico; la proteina contiene caratteristiche ripetizioni Kelch e un dominio BTB ed è soggetta a modificazioni post-traduzionali, tra cui S-nitrosilazione e ubiquitinazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 320–510 della KEAP1 umana; questa regione può consentire il riconoscimento della KEAP1 a lunghezza intera e potenzialmente di epitopi conservati tra le specie. Verificare la specificità nel proprio sistema campione.
• Per il Western blot, attendersi una banda corrispondente al peso molecolare previsto di circa 70 kDa. Includere controlli positivi e negativi appropriati.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), KEAP1 può essere rilevata sia nei compartimenti citoplasmatici sia in quelli nucleari. Valutare l'ottimizzazione delle fasi di fissazione e permeabilizzazione.
• La reattività crociata riportata include uomo, topo e ratto; tuttavia, le prestazioni in ciascuna specie devono essere validate utilizzando tessuti o linee cellulari pertinenti.
• Per l'ELISA, l'immunogeno proteico ricombinante suggerisce un potenziale impiego in configurazioni di cattura o rilevazione; confermare l'affinità di legame e la specificità utilizzando proteine target e di controllo.

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