Anticorpo policlonale di coniglio Anti-KHDRBS1/Sam68 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q07666

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di KHDRBS1/Sam68

• KHDRBS1/Sam68, noto anche come p62, p68 o fosfoproteina tirosica p62 associata a GAP, è una proteina legante l'RNA appartenente alla famiglia contenente il dominio KH. Esiste in più isoforme: l'isoforma 1 è quella canonica, mentre l'isoforma 3 è indotta nelle cellule in arresto della crescita.
• Agisce come proteina adattatrice chiave nelle cascate di trasduzione del segnale: viene reclutata e fosforilata sulla tirosina da recettori come quelli delle cellule T, della leptina e dell'insulina, quindi lega le proteine contenenti domini SH2 e SH3 per propagare il segnale.
• Svolge un ruolo nella progressione del ciclo cellulare nella fase G2-M e ha funzioni specifiche per isoforma; l'isoforma 3 inibisce la fase S se espressa in cellule in arresto della crescita.
• Regola lo splicing alternativo di molteplici trascritti: promuove l'inclusione o l'esclusione di esoni in bersagli come CD44 (dipendente dalla via Ras), BCL2L1 (favorisce l'isoforma Bcl-X(S)), SMN1, NRXN1 e NRXN3. Riferimenti correlati: PMID:26080397 PMID:17371836 PMID:20186123
• È coinvolto nel metabolismo dell'mRNA, inclusa la regolazione della stabilità, della traduzione e dell'esportazione nucleare. Regola positivamente la traduzione di mRNA contenenti CTE, anche se alcuni studi contestano il suo ruolo nell'esportazione nucleocitoplasmatica di CTE-RNA non splicati. Riferimenti correlati: PMID:22253824
• La localizzazione subcellulare è dinamica: si trova nel nucleo, nel citoplasma e sulla membrana, in linea con i suoi ruoli nella segnalazione e nel processing dell'RNA.
• È espresso ubiquitariamente in tutti i tessuti: i livelli dell'isoforma 1 sono più bassi nel cervello, muscolo scheletrico e fegato, mentre l'isoforma 3 è più abbondante nel muscolo scheletrico e nel fegato.
• È soggetto a molteplici modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione della tirosina, acetilazione, metilazione e ubiquitinazione, che modulano la sua attività e le sue interazioni.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide sintetico compreso tra gli amminoacidi 343-443 di KHDRBS1/Sam68 umano, che bersaglia una regione probabilmente conservata tra le specie, e supporta la reattività con uomo, topo e ratto.
• Per il Western blotting, considerare il peso molecolare previsto di ~48 kDa per l'isoforma canonica; bande aggiuntive possono rappresentare isoforme o forme modificate.
• In IHC-P e IF/ICC, è prevista una colorazione nucleare e citoplasmatica; si può osservare anche la localizzazione sulla membrana a seconda del tipo cellulare e dello stato di segnalazione. Convalidare i pattern di colorazione con controlli adeguati.
• L'anticorpo è adatto per ELISA, ma le diluizioni di lavoro ottimali devono essere determinate empiricamente per ogni formato di saggio.
• Essendo un anticorpo policlonale, può rilevare più isoforme e potenzialmente presentare reattività crociata con membri strettamente correlati della famiglia KHDRBS; confermare la specificità in modelli di knockout o knockdown se è richiesta una precisa discriminazione delle isoforme.

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