Anticorpo Policlonale Anti-Ki67 per WB, IHC-P, ELISA - P46013

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Ki67

• Ki67, codificato dal gene MKI67, è una proteina marcatrice della proliferazione ben consolidata (nota anche come Antigene KI-67 o Antigene Ki67).
• Durante la mitosi precoce, Ki67 si rilocalizza dai nucleoli alla superficie dei cromosomi, formando strutture estese simili a pennelli. Questi pennelli altamente carichi agiscono come un tensioattivo, prevenendo l'aggregazione cromosomica tramite repulsione sterica ed elettrostatica. Riferimenti correlati: PMID:27362226
• Nell'anafase, Ki67 passa a essere un attrattante cromosomico, subendo defosforilazione e separazione di fase liquido-liquido dipendente da RNA per promuovere il raggruppamento dei cromosomi. Riferimenti correlati: PMID:32879492, PMID:39153474, PMID:28935370
• Ki67 lega il DNA con una preferenza per sequenze superavvolte e ricche di AT, e interagisce anche con RNA ribosomiali prematuri durante l'anafase. Riferimenti correlati: PMID:10878551, PMID:28935370
• Potrebbe anche contribuire all'organizzazione della cromatina, sebbene il meccanismo diretto rimanga poco chiaro. Riferimenti correlati: PMID:24867636
• Ki67 si localizza nel nucleolo durante l'interfase e sulla superficie cromosomica durante la mitosi.
• La proteina è soggetta a varie modificazioni post-traduzionali, tra cui fosforilazione, acetilazione, formazione di legami isopeptidici e coniugazione con ubiquitina.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno ricombinante copre gli amminoacidi 460-680 del Ki67 umano (NP_002408.3), il che può influenzare la specificità dell'epitopo. Considerare questo aspetto durante la progettazione dei saggi di rilevamento.
• Per il western blot, notare l'elevato peso molecolare (~359 kDa); utilizzare gel SDS-PAGE a bassa percentuale e tempi di trasferimento prolungati o metodi di trasferimento in umido per garantire un trasferimento efficiente.
• Per IHC-P, validare le condizioni di recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo primario nel sistema di campioni rilevante. Includere controlli positivi (ad es., tessuti proliferativi) e negativi appropriati.
• Questo anticorpo mostra reattività crociata con il topo, consentendone l'uso in studi su xenotrapianti o modelli murini; tuttavia, verificare sperimentalmente le prestazioni specie-specifiche.
• Le applicazioni ELISA richiedono l'ottimizzazione dei protocolli di rivestimento e rilevamento.

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