Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Kininogen 1 (KNG1) per WB, IF/ICC, ELISA - P01042

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del Kininogen 1

• Il Kininogen-1 (KNG1) è una glicoproteina secreta che funge da precursore della bradichinina, un potente peptide vasoattivo, e agisce come inibitore delle proteasi tioliche.
• Esiste in due isoforme prodotte da splicing alternativo: chininogeno ad alto peso molecolare (HMWK) e chininogeno a basso peso molecolare (LMWK). L'HMWK svolge un ruolo critico nella via intrinseca della coagulazione del sangue posizionando la prekallicreina e il fattore XI sul fattore XII, mentre l'LMWK non è coinvolto nella coagulazione.
• Dopo il taglio da parte della callicreina plasmatica, l'HMWK rilascia bradichinina, che induce vasodilatazione, ipotensione, aumento della permeabilità vascolare e dolore; stimola anche il rilascio di altri mediatori infiammatori.
• La bradichinina mostra anche effetti cardioprotettivi, direttamente e tramite il fattore rilasciato dall'endotelio, e influenza la contrazione della muscolatura liscia, la natriuresi e il metabolismo del glucosio.
• Entrambe le isoforme inibiscono l'aggregazione piastrinica indotta da trombina e plasmina, contribuendo alla regolazione emostatica.
• Il KNG1 viene secreto nello spazio extracellulare e nel plasma; la T-chinina, un peptide correlato, è stata rilevata in carcinomi ovarici, del colon e della mammella maligni ma non in tumori benigni.
• Le modificazioni post-traduzionali includono idrossilazione, fosforilazione e formazione di legami disolfuro; è anche un acido pirrolidone carbossilico e una glicoproteina.
• Le mutazioni in KNG1 sono associate all'angioedema ereditario di tipo 6 (HAE6), un disturbo caratterizzato da episodi ricorrenti di grave gonfiore.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blot, per gli anticorpi policlonali si utilizza comunemente una diluizione iniziale di 1:500–1:2000; ottimizzare in base al campione e al sistema di rilevazione. Il peso molecolare previsto per KNG1 è di circa 72 kDa, sebbene la glicosilazione possa risultare in una massa apparente leggermente superiore.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica, considerare l'uso di un passaggio di permeabilizzazione per rilevare il chininogeno intracellulare, poiché la proteina è secreta e può essere localizzata in vescicole o sulla superficie cellulare.
• Per l'ELISA, questo anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; abbinarlo a un anticorpo accoppiato adatto per un ELISA sandwich o usarlo per misurare direttamente i livelli di chininogeno nel plasma o nei mezzi condizionati.
• Data la prevista reattività crociata con topo e ratto, verificare la reattività con la specifica specie e il modello tissutale, poiché l'omologia di sequenza suggerisce il riconoscimento ma non garantisce il legame.
• L'immunogeno comprende i residui 148-427, che includono il dominio della chinina; pertanto l'anticorpo probabilmente riconosce entrambe le isoforme HMWK e LMWK.
• Come per qualsiasi anticorpo policlonale, può verificarsi variabilità da lotto a lotto; si raccomanda un'ampia validazione nel proprio sistema sperimentale.

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