Anticorpo policlonale di coniglio anti-KLF1 per WB, ELISA - Q13351

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di KLF1

• Il fattore 1 simile a Krüppel (KLF1), noto anche come fattore eritroide simile a Krüppel (EKLF), è un fattore di trascrizione con dita di zinco che funge da regolatore principale dello sviluppo degli eritrociti, agendo come fattore interruttore generale durante l'eritropoiesi.
• KLF1 è un regolatore bifunzionale del passaggio dalle globine fetali a quelle adulte; attiva il gene della beta-globina adulta legandosi all'elemento promotore CACCC box e, contemporaneamente, reprime i geni della gamma-globina fetale (HBG1/HBG2) sovraregolando il repressore BCL11A.
• KLF1 attiva inoltre i promotori di CD44 e AQP1, che contribuiscono alle proprietà della membrana eritroide e alla segnalazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:21055716
• La proteina appartiene alla famiglia KLF dei fattori di trascrizione e contiene tre domini C-terminali a dita di zinco di tipo C2H2 che mediano il legame al DNA con elementi ricchi di GC/GT.
• KLF1 è localizzato prevalentemente nel nucleo, in linea con il suo ruolo di fattore di trascrizione.
• L'espressione è altamente limitata al midollo osseo adulto e al fegato fetale ed è assente nelle linee cellulari mieloidi e linfoidi, riflettendo la sua funzione eritroide-specifica.
• Modificazioni post-traduzionali quali acetilazione, sumoilazione, fosforilazione e metilazione ne modulano l'attività; il KLF1 sumoilato agisce come repressore reclutando il complesso CDH2/MI2beta e inibisce la differenziazione megacariocitica.
• Le mutazioni di KLF1 sono associate all'anemia diseritropoietica congenita di tipo IV (CDAN4), all'anemia emolitica ereditaria e al fenotipo del gruppo sanguigno In(Lu), sottolineandone l'importanza clinica nell'emopoiesi.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• In base alla progettazione dell'immunogeno (amminoacidi 211–311, che si sovrappongono al dominio di legame al DNA), si prevede che questo anticorpo rilevi il KLF1 endogeno nelle applicazioni di Western blot ed ELISA.
• Nel Western blot, dovrebbe essere osservata una banda di circa 38 kDa; si raccomanda l'uso di controlli positivi quali linee cellulari di eritroleucemia (ad es., K562) o lisati di midollo osseo, poiché l'espressione di KLF1 è eritroide-specifica.
• È stata osservata reattività crociata con il KLF1 di topo e ratto, ma si consiglia una validazione di conferma nel proprio modello sperimentale specifico.
• Nell'ELISA, considerare l'uso della proteina KLF1 ricombinante come standard e titolare le concentrazioni dell'anticorpo per ottimizzare il rapporto segnale/rumore.

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