Anticorpo policlonale anti-KLRK1 per WB, ELISA - P26718

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di KLRK1 (NKG2-D)

• NKG2-D, codificato dal gene KLRK1 (anche designato D12S2489E, NKG2D), è noto anche come recettore di tipo lectina-like delle cellule killer sottfamiglia K membro 1, CD314, o recettore delle cellule NK D. È una proteina integrale di membrana di tipo II.
• Funziona come recettore di attivazione e costimolatorio fondamentale per l'immunosorveglianza. Riconosce ligandi indotti da stress correlati alla classe I del MHC (es. MICA, MICB, ULBP1-6) sulle cellule tumorali e infette da virus, innescando la citotossicità delle cellule NK e la costimolazione delle cellule T CD8+.
• La segnalazione attraverso NKG2-D comporta un afflusso di calcio e porta all'eliminazione mediata da perforina delle cellule bersaglio e all'espressione di TNF-alfa.
• Localizzato sulla membrana cellulare, è espresso principalmente sulle cellule natural killer (NK), sulle cellule T alfa-beta CD8+, sulle cellule T gamma-delta e sulle cellule dendritiche killer produttrici di interferone (IKDC).
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione e formazione di legami disolfuro. Contiene un segnale di ancoraggio e un'elica transmembrana singola.
• Oltre all'immunità antitumorale, NKG2-D partecipa al rigetto del trapianto di midollo osseo e può regolare la differenziazione e la sopravvivenza delle cellule NK.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 77–216) corrisponde al dominio extracellulare di KLRK1 umano, suggerendo il riconoscimento di più epitopi, che può migliorare la sensibilità in WB ed ELISA.
• Per la WB, utilizzare condizioni riducenti e lisati cellulari totali da linee cellulari NK umane o murine (es. NK-92). Il peso molecolare previsto è di ~25 kDa, ma la glicosilazione può causare uno spostamento verso masse superiori; validare con un controllo positivo.
• In ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; tuttavia, le concentrazioni di lavoro ottimali devono essere determinate sperimentalmente. Validare la reattività incrociata nei campioni murini, poiché il fornitore riporta reattività con le proteine umane e murine.
• È richiesto un anticorpo secondario appropriato (anti-coniglio) e un tampone di blocco. Evitare cicli di congelamento-scongelamento per mantenere la stabilità.

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