Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-KLRK1 per IF/ICC ed ELISA - P26718

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di KLRK1/NKG2D

• KLRK1 (noto anche come NKG2D, CD314) codifica per la proteina di membrana integrale di tipo II NKG2-D, un membro 1 della sottofamiglia K dei recettori lectina-simili delle cellule killer. Funziona come recettore attivante e costimolatorio centrale nell'immunosorveglianza innata e adattativa.
• Legandosi a ligandi correlati alle MHC di classe I indotti da stress (es. MICA/B, ULBP1-6) su cellule tumorali o infettate da virus, NKG2D trasmette segnali stimolatori che innescano un afflusso di calcio, culminando nell'espressione di TNF-alfa e nella citotossicità mediata da perforina.
• Nelle cellule natural killer (NK), NKG2D fornisce sia segnali di attivazione primaria che costimolatori, mentre nelle cellule T CD8+ agisce come recettore costimolatorio che amplifica le risposte adattative mediate dal TCR.
• Il recettore è espresso essenzialmente su tutte le cellule NK CD56+CD3- del sangue periferico, così come su cellule T CD8+ alfa-beta e gamma-delta e sulle cellule dendritiche killer produttrici di interferone (IKDCs).
• A livello subcellulare, NKG2D si localizza sulla membrana cellulare come proteina transmembrana con una topologia di ancoraggio del segnale. È soggetto a glicosilazione e contiene un legame disolfuro all'interno del suo dominio extracellulare di legame del ligando.
• Studi strutturali (struttura 3D) hanno chiarito l'interfaccia di legame con i ligandi, e la proteina è un membro del proteoma di riferimento con splicing alternativo che genera isoforme aggiuntive.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno era un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 50–150 di KLRK1 umano (NP_031386.2). Per un corretto riconoscimento, assicurarsi che l'anticorpo venga applicato a campioni in cui la sequenza target è preservata e l'epitopo è accessibile (es. condizioni non denaturanti per IF/ICC).
• Validare l'anticorpo nel vostro specifico contesto cellulare utilizzando controlli positivi come cellule NK attivate da IL-2 o linee cellulari di linfociti T CD8+ note per esprimere KLRK1. Per l'ELISA, considerare l'accoppiamento con un anticorpo di cattura se si sviluppa un saggio immunoenzimatico sandwich.
• Sebbene non testato qui, KLRK1 è una proteina transmembrana con un dominio extracellulare di legame del ligando; considerare protocolli di colorazione di superficie cellulare che evitino la permeabilizzazione per la rilevazione della membrana intatta negli esperimenti di citometria a flusso.

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