Anticorpo policlonale Anti-KMT2A (Validato KO) per WB ed ELISA - Q03164

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della KMT2A

• L'istidina-lisina N-metiltransferasi 2A (KMT2A), nota anche come MLL, HRX o ALL-1, è unembro della famiglia dei regolatori della cromatina Trithorax. Gioca un ruolo essenziale nello sviluppo precoce e nell'ematopoiesi attraverso la metilazione dell'istone H3K4 (PubMed:12453419, PubMed:15960975, PubMed:19187761). Riferimenti correlati: PMID:12453419 PMID:15960975 PMID:19187761
• KMT2A è la subunità catalitica del complesso MLL1/MLL, che media sia la metilazione H3K4 che l'acetilazione H4K16, regolando così l'accessibilità della cromatina ai promotori dei geni attivi.
• Si lega a elementi CpG non metilati nelle regioni del promotore e aiuta a mantenere il loro stato non metilato. Questa attività è richiesta per l'attivazione trascrizionale di geni bersaglio come HOXA9 (PubMed:20010842, PubMed:20677832). Riferimenti correlati: PMID:20010842 PMID:20677832
• KMT2A promuove l'apoptosi indotta da PPP1R15A, evidenziando un ruolo nella morte cellulare programmata (PubMed:10490642). Riferimenti correlati: PMID:10490642
• Nell'orologio circadiano, KMT2A stabilisce uno stato cromatinico permissivo attraverso la metilazione ritmica di H3K4, che facilita il reclutamento di CLOCK-BMAL1 e l'espressione dei geni circadiani (Per somiglianza).
• La proteina presenta attività di auto-metilazione sulla cisteina 3882 in assenza di substrati istonici (PubMed:24235145). Riferimenti correlati: PMID:24235145
• KMT2A è prevalentemente localizzata nel nucleo ed è espressa nel cuore, polmone, cervello e nei linfociti T e B. È classificata come proto-oncogene ed è frequentemente coinvolta in riarrangiamenti cromosomici associati a leucemie acute.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 752–949 della KMT2A umana, situati nella regione N-terminale. Questo anticorpo può rilevare la KMT2A a lunghezza intera così come frammenti N-terminali o proteine di fusione derivanti da traslocazioni cromosomiche, rendendolo potenzialmente utile per lo studio delle leucemie con riarrangiamento MLL.
• A causa dell'elevato peso molecolare della KMT2A (~432 kDa), considerare l'uso di gel SDS-PAGE a bassa percentuale (es. 6–8%) e tempi di trasferimento umido prolungati (>4 ore a 30 V) per il western blot. La colorazione di Coomassie del gel dopo il trasferimento può aiutare a confermare l'efficiente migrazione delle proteine.
• Per il western blot, validare l'anticorpo in linee cellulari o campioni tissutali knockout (KO) per confermare la specificità, come indicato dallo stato di validazione KO. Includere appropriati controlli positivi e negativi.
• Nelle applicazioni ELISA, la natura policlonale dell'anticorpo fornisce un'ampia copertura dell'epitopo ma potrebbe richiedere un'attenta ottimizzazione del blocco e del lavaggio per ridurre il rumore di fondo.

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