Anticorpo monoclonale di coniglio anti-KMT5A/SETD8 (validato per KD) per WB, ELISA - Q9NQR1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di KMT5A/SETD8

• KMT5A/SETD8 è una metiltransferasi delle N-lisine che monometila sia le proteine istoniche sia quelle non istoniche, svolgendo un ruolo critico nella regolazione epigenetica.
• Monometila specificamente l'istone H4 in Lys-20 (H4K20me1), un marcatore arricchito durante la mitosi e associato alla repressione trascrizionale nell'eucromatina.
  Riferimenti correlati:
  PMID:12086618
  PMID:12121615
  PMID:15200950
• L'enzima preferisce i substrati nucleosomici rispetto agli istoni liberi, sottolineando il suo ruolo nella biologia della cromatina.
  Riferimenti correlati:
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• KMT5A è necessaria per una corretta proliferazione cellulare, la condensazione dei cromosomi e la citocinesi, probabilmente mantenendo la struttura del DNA di ordine superiore durante la mitosi.
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• Oltre agli istoni, monometila p53/TP53 in Lys-382, contribuendo alla repressione dei geni bersaglio di p53.
  Riferimenti correlati:
  PMID:17707234
• Regola inoltre negativamente la segnalazione del TGF-beta e promuove la migrazione cellulare.
  Riferimenti correlati:
  PMID:23478445
• KMT5A è soggetta ad acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, come indicato da studi di proteomica e strutturali. Queste modifiche possono regolarne l'attività e la stabilità.
• A livello subcellulare, KMT5A si localizza nel nucleo e si associa ai cromosomi, coerentemente con le sue funzioni nella modificazione della cromatina e nella regolazione mitotica.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Durante l'esecuzione del Western blot, per KMT5A/SETD8 a lunghezza completa si prevede una banda intorno a 43 kDa. Assicurarsi di utilizzare protocolli adeguati di estrazione nucleare per arricchire la proteina bersaglio.
• Poiché l'anticorpo è validato per KD, prendere in considerazione l'utilizzo di campioni sottoposti a knockdown o knockout come controlli negativi per confermarne la specificità nel proprio sistema sperimentale.
• Per l'ELISA, il peptide immunizzante (aa 1–100) può essere utilizzato come controllo positivo; è possibile applicare protocolli ELISA standard a sandwich o indiretti.
• Sebbene sia raccomandata per campioni umani e murini, la reattività crociata con altre specie non è confermata; procedere alla validazione se necessario.

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