Anticorpo policlonale di coniglio Anti-[KO Validated] Calpain 2 per WB, IHC-P, ELISA - P17655

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Calpain-2

• La Calpain-2, nota anche come M-calpain, è la grande subunità catalitica della calpaina-2, proteasi neutra attivata dal calcio, codificata dal gene CAPN2. Appartiene alla famiglia delle peptidasi C2 e funziona come eterodimero con una piccola subunità regolatoria.
• Come tiol-proteasi non lisosomiale regolata dal calcio, catalizza la proteolisi limitata di substrati coinvolti nel rimodellamento del citoscheletro e nella trasduzione del segnale, svolgendo un ruolo nella migrazione, proliferazione e differenziazione cellulare.
• La Calpain-2 cliva proteoliticamente la miocilina (MYOC) in corrispondenza dell'Arg-226, un evento di clivaggio implicato nella regolazione della pressione intraoculare (PubMed:17650508). Riferimenti correlati: PMID:17650508
• Dopo la stimolazione neuronale, la calpain-2 cliva CPEB3, annullando la sua attività di repressore traslazionale e permettendo quindi la traduzione degli mRNA bersaglio di CPEB3 (per similarità).
• La localizzazione subcellulare è principalmente citoplasmatica e associata alla membrana cellulare, coerente con la sua attivazione e traslocazione dipendenti dal calcio.
• L'espressione tissutale è ubiquitaria, e riflette il suo ruolo fondamentale nei processi proteolitici cellulari in numerosi organi e tipi cellulari.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e clivaggio autocatalitico, che regolano la sua attività e funzione. Contiene domini strutturali chiave come il dominio catalitico della calpaina e i domini leganti il calcio, ed è classificata nelle famiglie delle tiol proteasi e delle idrolasi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è stato generato utilizzando una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 350–680 della Calpain-2 umana (NP_001739.2), una regione che copre parte del dominio catalitico e il dominio legante il calcio di tipo C2. Considera questo design dell'immunogeno durante la validazione della reattività nel tuo sistema modello.
• Per applicazioni Western blot (WB), aspettati una banda al peso molecolare previsto di ~80 kDa. Tieni presente che la calpain-2 può subire un processamento autocatalitico, che potrebbe generare ulteriori frammenti di peso molecolare inferiore.
• L'anticorpo è adatto anche per immunoistochimica (IHC-P) e ELISA. Quando esegui l'IHC, includi controlli appropriati e ottimizza le condizioni di recupero dell'antigene per i tessuti di tuo interesse.
• È stata osservata reattività crociata con campioni di uomo, topo e ratto. Per altre specie, verifica l'omologia della sequenza, in particolare nella regione dell'immunogeno, prima dell'uso.
• Poiché l'attività della calpain-2 dipende dal calcio, considera la concentrazione di calcio nei tuoi tamponi di lisi e nelle condizioni sperimentali, poiché potrebbe influenzare l'autolisi della proteasi e la disponibilità dell'epitopo.

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