Anticorpo Policlonale Anti-KPNA4 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O00629

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di KPNA4

• KPNA4 codifica per la subunità alfa-3 dell'importina (nota anche come importina alfa Q1, Qip1 o carioferina subunità alfa-4), una proteina adattatrice di 58 kDa critica per l'importazione nucleare classica. Riferimenti correlati: PMID:20818336
• Funziona legando substrati contenenti segnali di localizzazione nucleare (NLS) semplici o bipartiti e collegandoli all'importina beta (KPNB1) per il trasporto attraverso il complesso del poro nucleare (NPC). Riferimenti correlati: PMID:20818336, PMID:28760339, PMID:29042532
• Il complesso importina-substrato si ancora all'NPC tramite interazioni KPNB1-nucleoporina e si trasloca in modo dipendente da Ran-GTP e che richiede energia; la direzionalità è ottenuta dalla distribuzione asimmetrica di Ran-GTP e Ran-GDP. Riferimenti correlati: PMID:20818336, PMID:28760339, PMID:29042532
• KPNA4 media l'importazione nucleare di vari carichi, inclusi AARS1, MRTFA e RANBP3, e facilita anche l'ingresso nucleare di proteine virali come UL84 del citomegalovirus umano tramite riconoscimento di NLS non classici. Riferimenti correlati: PMID:10567565, PMID:20818336, PMID:28760339
• Subcellularmente, KPNA4 si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, in linea con il suo ruolo nel trasportare carichi nel nucleo.
• La proteina è altamente espressa in testicolo, ovaio, intestino tenue, cuore, muscolo scheletrico, polmone e pancreas, con bassa espressione in rene, timo, colon e leucociti del sangue periferico.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione; la proteina contiene domini ripetuti Armadillo essenziali per il legame NLS ed è classificata come membro del proteoma di riferimento coinvolto nel trasporto proteico e nelle interazioni ospite-virus.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è rivolto agli amminoacidi N-terminali 1-240 di KPNA4 umano, il che può conferire specificità per la subunità alfa dell'importina rispetto ad altri membri della famiglia delle carioferine; tuttavia, si raccomanda la validazione nel sistema modello rilevante.
• Per il Western blotting, ci si aspetta una banda vicino a 58 kDa in condizioni riducenti; si consiglia di titolare la concentrazione dell'anticorpo per un rapporto segnale-rumore ottimale.
• Nell'immunocitochimica e nell'immunofluorescenza, poiché KPNA4 si sposta tra citoplasma e nucleo, entrambi i compartimenti possono mostrare colorazione; l'accumulo nucleare può essere più prominente in determinate condizioni.
• Per l'immunoistochimica su sezioni in paraffina, il recupero dell'antigene e l'ottimizzazione su array tissutali contenenti tessuti ad alta e bassa espressione (es. testicolo vs. rene) possono aiutare a confermare la specificità.
• L'anticorpo reagisce in modo crociato con topo e ratto, rendendolo adatto per studi ortologhi; tuttavia, la reattività crociata dovrebbe essere verificata nel lisato di ciascuna specie.
• Quando si utilizza per ELISA, considerare che gli anticorpi policlonali possono fornire una copertura epitopica più ampia ma possono anche mostrare un fondo più alto; l'ottimizzazione dei passaggi di blocco e lavaggio è fondamentale.

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