Anticorpo policlonale rabbit Anti-Ku70 per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P12956

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Ku70

• Ku70 (XRCC6) è una proteina chiave legante il DNA che media la riparazione delle rotture doppio filamento del DNA (DSB) attraverso la via classica della giunzione non omologa delle estremità (NHEJ). Forma un eterodimero con Ku80 (XRCC5) per creare il complesso Ku, che riconosce e lega specificamente le estremità del DNA rotto, fungendo da impalcatura per reclutare i fattori di riparazione essenziali. (PubMed:11493912, PubMed:20493174, PubMed:33854234) Riferimenti correlati: PMID:11493912, PMID:20493174, PMID:33854234
• La via NHEJ dipendente da Ku è fondamentale per la ricombinazione V(D)J, il processo che genera la diversità degli anticorpi e dei recettori dei linfociti T, evidenziando il suo ruolo essenziale nell'immunità adattativa. (PubMed:9742108) Riferimenti correlati: PMID:9742108
• Ku70 possiede attività 5'-deossiribosio-5-fosfato (5'-dRP) liasi, che pulisce i siti abasici vicino ai DSB per preparare le estremità del DNA alla legazione. Studi in vitro suggeriscono anche un'attività DNA elicasi 3'-5', sebbene la sua rilevanza fisiologica rimanga non chiara. (PubMed:20383123, PubMed:7957065) Riferimenti correlati: PMID:20383123, PMID:7957065
• Oltre alla riparazione, Ku70 contribuisce al mantenimento dei telomeri e agisce come cofattore trascrizionale per diversi fattori di trascrizione, collegando la riparazione del DNA a processi cellulari più ampi. (PubMed:29490055, PubMed:12145306, PubMed:8621488) Riferimenti correlati: PMID:29490055, PMID:12145306, PMID:8621488
• Ku70 svolge un ruolo nell'immunità antivirale innata assemblando il complesso HDP-RNP, che facilita la fosforilazione di IRF3 e l'attivazione della via cGAS-STING. (PubMed:28712728) Riferimenti correlati: PMID:28712728
• Può anche legare RNA cellulari e reclutare PRKDC per partecipare alla biogenesi dell'RNA ribosomiale, indicando una versatilità funzionale. (PubMed:32103174) Riferimenti correlati: PMID:32103174
• Ku70 regola negativamente l'apoptosi interagendo e sequestrando BAX allontanandolo dai mitocondri; può anche deubiquitinare BAX. (PubMed:15023334, PubMed:18362350, PubMed:35545041) Riferimenti correlati: PMID:15023334, PMID:18362350, PMID:35545041
• Subcellularmente, Ku70 è prevalentemente nucleare e associato ai cromosomi, ma può essere trovato anche nel citoplasma in determinate condizioni, in linea con le sue molteplici funzioni.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 501-600 di Ku70 umano. Si prevede che questa regione interna generi anticorpi che riconoscono la proteina nativa full-length. Si consiglia di convalidare la specificità dell'anticorpo utilizzando lisati cellulari di knockdown o knockout.
• Date le applicazioni elencate (WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA), è consigliabile ottimizzare sperimentalmente le diluizioni per ogni test. Per Western blot, è prevista una banda intorno a 70 kDa; l'uso di condizioni riducenti è tipico per questo bersaglio.
• È riportata la reattività crociata con Ku70 di topo e ratto; gli utenti devono confermare le prestazioni nei loro specifici sistemi di campioni. Per IHC e IF, devono essere testati protocolli di fissazione e permeabilizzazione adeguati.
• Poiché gli anticorpi policlonali possono presentare variazioni tra lotti, includere controlli positivi e negativi adeguati in tutti gli esperimenti.

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