Anticorpo Monoclonale Anti-Ku80 da Coniglio per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P13010

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Ku80

• La proteina Ku80, nota anche come XRCC5, KU86, KUB2 o NFIV, è la subunità da 86 kDa dell'autoantigene Ku, un complesso eterodimerico che lega il DNA ed è essenziale per la riparazione delle rotture doppio filamento del DNA (DSB) tramite la via classica della giunzione non omologa delle estremità (NHEJ). Insieme a XRCC6 (Ku70) forma l'eterodimero Ku70:Ku80 che si lega direttamente alle estremità delle DSB e funge da impalcatura per l'assemblaggio del macchinario centrale di riparazione NHEJ, tra cui PRKDC (DNA-PKcs), per allineare e legare le estremità del DNA danneggiato. Riferimenti bibliografici: PMID:11493912, PMID:33854234, PMID:34352203
• Ku80 è indispensabile per la ricombinazione V(D)J, un processo specializzato guidato dalla NHEJ che genera il repertorio diversificato di recettori delle cellule T e immunoglobuline durante lo sviluppo dei linfociti. Riferimenti bibliografici: PMID:9742108
• Oltre al suo ruolo strutturale, Ku80 possiede attività 5'-deossiribosio-5-fosfato liasi, che rimuove i siti abasici vicini alle terminazioni delle DSB preparandole per la legazione. È stata anche riportata un'attività DNA elicasi 3'-5', anche se la sua rilevanza in vivo rimane incerta. Riferimenti bibliografici: PMID:20383123, PMID:7957065
• Ku80 è implicato nel mantenimento dei telomeri, contribuendo alla protezione e alla regolazione delle estremità cromosomiche. Riferimenti bibliografici: PMID:29490055
• Al di là della riparazione del DNA, Ku80 funziona come cofattore trascrizionale, regolando l'espressione genica interagendo con diversi fattori di trascrizione. Riferimenti bibliografici: PMID:12145306, PMID:8621488
• Ku80 partecipa alla risposta immunitaria innata contro i DNA virus assemblandosi nel complesso HDP-RNP, che agisce da piattaforma per la fosforilazione di IRF3 e attiva la via cGAS-STING. Riferimenti bibliografici: PMID:28712728
• Ku80 può legare gli RNA cellulari e reclutare PRKDC, svolgendo un ruolo nella biogenesi dei ribosomi, in particolare tramite l'interazione con l'RNA nucleolare piccolo U3. Riferimenti bibliografici: PMID:32103174
• Localizzato principalmente nel nucleo e nel nucleolo, Ku80 è associato alla cromatina ed è soggetto a molteplici modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione, ADP-ribosilazione e coniugazione ubiquitino-simile.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• Progettazione dell'immunogeno: L'anticorpo è stato prodotto contro un peptide sintetico che copre la regione amminoacidica 633–732 di Ku80 umano. Durante la progettazione degli esperimenti di validazione, tenere in considerazione che questa regione può essere soggetta a modifiche post-traduzionali o eventi di splicing alternativo che potrebbero influenzare il legame dell'anticorpo.
• Western blotting (WB): È prevista una banda specifica di circa 83 kDa nei lisati cellulari umani. Includere appropriati controlli positivi e negativi (ad esempio campioni trattati con siRNA o knockout per Ku80) per confermare la specificità.
• Immunohistochimica (IHC-P) e immunofluorescenza (IF/ICC): Ku80 presenta una localizzazione nucleare e nucleolare. Ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per il tuo tipo di tessuto o cellula e validare la colorazione con un marcatore nucleare noto.
• Immunoprecipitazione (IP): Questo anticorpo può essere utilizzato per precipitare il complesso Ku70/Ku80. La co-immunoprecipitazione di Ku70 (XRCC6) serve come controllo funzionale.
• ELISA: Adatto per formati ELISA diretti o a sandwich. Validare la reattività crociata con altre specie se necessario, poiché l'anticorpo è specifico per la reattività umana.

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