Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Lactil-Istone H4 (K5) (P62805) per WB, DB, ELISA

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H4

L'istone H4 è un componente centrale del nucleosoma, avvolge e compatta il DNA in cromatina per regolare l'accesso per la trascrizione, la riparazione del DNA, la replicazione e la stabilità cromosomica. La modulazione dinamica della struttura della cromatina è governata da un complesso insieme di modifiche post-traduzionali (PTM), collettivamente definite "codice istonico". Riferimenti correlati: UniProt P62805

La latilazione dell'istone H4 in lisina 5 (corrispondente a K6 nella numerazione UniProt) è stata identificata come un nuovo marcatore epigenetico che collega il metabolismo cellulare alla regolazione genica. Questa modifica è stata caratterizzata in macrofagi e cellule tumorali, dove è indotta dall'accumulo di lattato e contribuisce all'attivazione di programmi di espressione genica riparativa PMID:31645732. Ulteriori siti di latilazione sono stati mappati in K9, K13, K17, K32, K78 e K92, sottolineando il ruolo diffuso di questa acilazione nella segnalazione cromatinica PMID:31645732, PMID:37720100.

L'istone H4 si localizza principalmente nel nucleo ed è integrato nei cromosomi durante tutto il ciclo cellulare. L'H4 acetilato è arricchito nei nuclei degli spermatidi in maturazione UniProt P62805.

Oltre alla latilazione, l'istone H4 subisce modifiche estese e combinate, tra cui acetilazione, metilazione, fosforilazione, crotonilazione, succinilazione e butirrilazione su più residui, ciascuna delle quali contribuisce a stati cromatinici e risultati funzionali distinti. I siti di modifica chiave e i loro enzimi modificatori sono stati ampiamente catalogati. Riferimenti correlati: PMID:17967882, PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:21925322, PMID:22389435, PMID:27105113.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico latilato che comprende la lisina 5 dell'istone H4 umano. Per un'ottimale specificità, considerare l'uso di un peptide non latilato o controlli di pre-adsorbimento nel proprio saggio.
• Questo anticorpo è riportato per Western blot (WB), dot blot (DB) ed ELISA. Per il WB, ci si aspetta una banda tipica a ~11 kDa. Il rilevamento dell'istone H4 latilato endogeno potrebbe richiedere l'arricchimento o l'ottimizzazione delle condizioni di lisi a causa della bassa stechiometria.
• L'ampia cross-reattività prevista (Umano, Topo, Ratto e altri) suggerisce sequenze epitopiche conservate tra le specie. Tuttavia, è raccomandata una validazione specie-specifica.
• Quando si utilizza questo anticorpo in ELISA o dot blot, confermare l'efficienza di rivestimento con antigeni latilati di controllo positivo e considerare il blocco con BSA latilata per ridurre il fondo.
• Per applicazioni correlate alla cromatina, sono consigliabili protocolli di estrazione degli istoni (estrazione acida o estrazione salina) per arricchire gli istoni modificati.
• Convalidare sempre le prestazioni dell'anticorpo nel sistema di campioni pertinente, poiché le modifiche post-traduzionali dipendono dal contesto e possono variare con il tipo cellulare e lo stato metabolico.

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