Anticorpo Monoclonale Anti-Lamin A/C per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P02545

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Lamin A/C

• Le Lamine A e C sono componenti principali della lamina nucleare, una rete filamentosa sottostante la membrana nucleare interna, e sono codificate dal gene LMNA attraverso splicing alternativo.
• Forniscono supporto strutturale all'involucro nucleare, collegano la cromatina all'involucro nucleare e regolano l'assemblaggio nucleare, l'organizzazione della cromatina e la dinamica dei telomeri. Riferimenti correlati: PMID:10080180, PMID:10580070, PMID:10587585
• Le lamine svolgono un ruolo nella riparazione del DNA: la Lamin A/C viene reclutata alle rotture del doppio filamento di DNA da XRCC4 e IFFO1, immobilizzando le estremità rotte del DNA per prevenire traslocazioni cromosomiche. Riferimenti correlati: PMID:31548606
• La Lamin A/C regola la rigidità della matrice conferendo proprietà meccaniche nucleari, influenzando la migrazione e la differenziazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:23990565, PMID:25127216
• La localizzazione subcellulare include la lamina nucleare, l'involucro nucleare, il nucleoplasma, la matrice nucleare e le speckles nucleari.
• Modifiche post-traduzionali come prenilazione, metilazione, fosforilazione, acetilazione e formazione di legami isopeptidici regolano l'assemblaggio e la funzione delle lamine.
• In modo specifico per tessuto, la prelamin-A/C si accumula nelle cellule muscolari lisce vascolari invecchiate e nelle lesioni aterosclerotiche, contribuendo alla senescenza cellulare. Riferimenti correlati: PMID:20458013
• Le mutazioni in LMNA causano laminopatie, tra cui la distrofia muscolare di Emery-Dreifuss, la cardiomiopatia dilatativa, la lipodistrofia e le sindromi progeroidi.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 403–572, corrispondenti al dominio della coda C-terminale comune alla lamin A e C, che è meno conservato tra le proteine dei filamenti intermedi, suggerendo un'elevata specificità.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è ~74 kDa per la lamin A e ~65 kDa per la lamin C; possono essere rilevate entrambe le bande. Validare utilizzando estratti nucleari da linee cellulari umane, di topo o di ratto.
• Per IHC-P e IF/ICC, ci si aspetta una colorazione dell'involucro nucleare e del nucleoplasma. Per tessuti fissati in formalina, potrebbe essere necessaria l'ottimizzazione del recupero dell'antigene e della permeabilizzazione.
• Per IP ed ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per arricchire i complessi della lamin A/C; tuttavia, le condizioni di blocco e lavaggio dovrebbero essere determinate empiricamente.
• Data la validazione KO, questo anticorpo è adatto per confermare la deplezione della lamin A/C e per studiare i fenotipi di perdita di funzione nei saggi di organizzazione nucleare e riparazione del DNA.

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