Anticorpo policlonale anti-LAMP2 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P13473

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di LAMP2

• LAMP2 (glicoproteina di membrana 2 associata ai lisosomi), nota anche come CD107b, LAMPB o LGP-96, è codificata dal gene LAMP2 ed è presente in tre isoforme generate da splicing alternativo: LAMP-2A, LAMP-2B e LAMP-2C.
• È essenziale per la biogenesi dei lisosomi e il mantenimento del pH lisosomiale, inibendo direttamente il canale protonico TMEM175 e facilitando così l'acidificazione lisosomiale necessaria per un'attività ottimale delle idrolasi (PubMed:37390818).
  Riferimenti correlati: PMID:37390818
• Svolge un ruolo fondamentale nell'autofagia mediata da chaperoni (CMA), legandosi alle proteine substrato (ad es. GAPDH, GPX4, NLRP3, MLLT11) riconosciute da HSPA8/HSC70 e indirizzandole alla degradazione lisosomiale, un processo importante per il controllo della qualità proteica e le risposte allo stress (PubMed:11082038, PubMed:18644871, PubMed:24880125, PubMed:36586411).
  Riferimenti correlati: PMID:11082038 PMID:18644871 PMID:24880125 PMID:36586411
• È necessaria per la fusione degli autofagosomi con i lisosomi durante la macroautofagia, poiché le cellule prive di LAMP2 non riescono ad accumulare STX17 sugli autofagosomi, impedendo la fusione e la degradazione del contenuto autofagico (PubMed:27628032).
  Riferimenti correlati: PMID:27628032
• Favorisce un'efficiente presentazione degli antigeni esogeni mediata dall'MHC di classe II, garantendo una corretta degradazione lisosomiale, sebbene non sia necessaria per la presentazione degli antigeni endogeni (PubMed:15894275, PubMed:20518820).
  Riferimenti correlati: PMID:15894275 PMID:20518820
• Si localizza sulle membrane dei lisosomi, degli endosomi tardivi, degli autofagosomi e sulla superficie cellulare, in accordo con il suo traffico attraverso le vie endocitiche e autofagiche.
• Le isoforme mostrano un'espressione tessuto-specifica: LAMP-2A è altamente espressa nella placenta, nei polmoni e nel fegato; LAMP-2B è ampiamente espressa; LAMP-2C è rilevata nell'intestino, nel cuore, nel cervello e nel muscolo scheletrico (PubMed:26856698, PubMed:7488019).
  Riferimenti correlati: PMID:26856698 PMID:7488019
• È fortemente glicosilata e contiene ponti disolfuro; è classificata come glicoproteina e proteina transmembrana. È associata alla malattia di Danon (malattia da accumulo di glicogeno dovuta a carenza di LAMP2).

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio luminale di LAMP2 umano (aa 29-375), che è fortemente glicosilato. Tenere conto di questo aspetto nell'interpretazione degli spostamenti del peso molecolare nel western blot; la banda osservata può apparire più grande dei 45 kDa previsti a causa dell'estesa glicosilazione.
• Per il western blot (WB), validare l'anticorpo nella propria matrice campione specifica; utilizzare condizioni riducenti e caricare controlli appropriati.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), possono essere necessari metodi di recupero antigenico (ad es. il recupero degli epitopi indotto dal calore) per rendere accessibili gli epitopi di LAMP2, soprattutto nei tessuti fissati in formalina e inclusi in paraffina.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), la colorazione di LAMP2 dovrebbe mostrare un pattern lisosomiale punteggiato; per la conferma si raccomanda la co-colorazione con marcatori lisosomiali (ad es. LAMP1).
• Questo anticorpo policlonale può presentare variazioni tra diversi lotti; includere controlli positivi e negativi in ogni esperimento.

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