Anticorpo policlonale anti-LAMP2 (validato KO) per WB, IHC-P, ELISA - P13473

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di LAMP2

• LAMP2 (glicoproteina di membrana associata ai lisosomi 2), indicata anche come CD107b e LGP-96, è una proteina transmembrana altamente glicosilata, localizzata principalmente sulle membrane lisosomiali ed endosomiali.
• Funziona come regolatore chiave del pH lisosomiale inibendo direttamente il canale protonico TMEM175 e facilitando così l'acidificazione lisosomiale, essenziale per l'attività delle idrolasi.
  Riferimenti correlati:
  PMID:37390818
• Svolge un ruolo centrale nell'autofagia mediata da chaperoni (CMA), legandosi alle proteine substrato (ad es. GAPDH, GPX4) riconosciute dagli chaperoni HSC70 e indirizzandole alla degradazione lisosomiale.
  Riferimenti correlati:
  PMID:11082038
  PMID:18644871
  PMID:24880125
• È essenziale per la fusione tra autofagosomi e lisosomi; le cellule carenti di LAMP2 non riescono ad accumulare syntaxin 17 (STX17) sugli autofagosomi, bloccando il flusso autofagico.
  Riferimenti correlati:
  PMID:27628032
• Tre isoforme principali (LAMP-2A, LAMP-2B, LAMP-2C) sono prodotte mediante splicing alternativo e presentano ciascuna una distribuzione tissutale distinta: LAMP-2A è abbondante nella placenta, nei polmoni e nel fegato; LAMP-2B è ampiamente espressa; LAMP-2C è arricchita nell'intestino tenue, nel colon, nel cuore, nel cervello e nel muscolo scheletrico.
• A livello subcellulare, LAMP2 è presente sulla membrana dei lisosomi, degli endosomi tardivi, sulla superficie cellulare e sugli autofagosomi, in accordo con il suo traffico e i suoi ruoli nell'autofagia.
• Supporta l'elaborazione post-traduzionale di alcune glicoproteine virali; ad esempio, interagisce con FURIN per promuovere il clivaggio della proteina di fusione F del virus della parotite.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 29–375 del dominio luminale di LAMP2 umano, una regione conservata nel topo, consentendo la reattività crociata in entrambe le specie.
• Nel western blot, può essere osservata una banda intorno a 45–110 kDa a causa della forte glicosilazione N- e O-legata; le condizioni riducenti e gli enzimi di deglicosilazione possono contribuire a confermare la specificità.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), si consiglia di utilizzare il recupero antigenico indotto da proteasi e di validare la colorazione in tessuti con elevata espressione di LAMP2 (ad es. placenta, fegato).
• Essendo un anticorpo policlonale, può riconoscere più isoforme di LAMP2; la validazione KO ne conferma la specificità ed è raccomandata per gli esperimenti critici.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato sia come reagente di cattura sia come reagente di rilevazione, dopo un'appropriata titolazione e il pairing con un sistema di rilevazione idoneo.

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