Anticorpo policlonale anti-LEF1 per WB, IP, IF-P, ELISA - Q9UJU2

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di LEF1

• LEF1 (Lymphoid enhancer-binding factor 1) è un fattore di trascrizione che lega il DNA in modo sequenza-specifico e partecipa alla via di segnalazione Wnt. Riferimenti correlati: PMID:2010090
• Attiva la trascrizione del gene bersaglio in presenza di CTNNB1 ed EP300; le proteine della famiglia TLE (TLE1-4) reprimono la transattivazione mediata da LEF1/CTNNB1. Riferimenti correlati: PMID:11266540
• LEF1 regola la funzione dell'enhancer del recettore delle cellule T alfa ed è necessario per la maturazione delle cellule T γδ che esprimono IL17A tramite la modulazione di BLK (per similarità). Riferimenti correlati: PMID:19653274
• Un'isoforma priva del dominio di interazione con CTNNB1 può agire come antagonista della segnalazione Wnt.
• Nel cancro al pancreas, LEF1 attiva trascrizionalmente MYC e CCND1 per migliorare la proliferazione, promuovendo al contempo la migrazione reprimendo l'E-caderina e attivando la fibronectina in modo indipendente da CTNNB1.
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente nucleare.
• Specificità tissutale: rilevato nel timo; altamente espresso nelle biopsie e nelle linee cellulari di cancro al colon e al pancreas; debolmente espresso nel tessuto pancreatico normale. Le isoforme 1 e 5 sono rilevate nelle linee cellulari pancreatiche.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, formazione di legami isopeptidici e coniugazione con ubiquitina. Classificato come fattore di trascrizione che lega il DNA con ruoli nella segnalazione Wnt e nella displasia ectodermica.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 20–132 di LEF1 umano (NP_057353.1), una regione che comprende il dominio di legame N-terminale della β-catenina; la natura policlonale può consentire il riconoscimento di LEF1 a lunghezza intera e delle isoforme contenenti questa regione.
• Per il Western blot, è prevista una banda vicino a 44 kDa; convalidare la dimensione della banda nel proprio sistema di campioni, poiché le modifiche post-traduzionali possono spostare la migrazione.
• L'anticorpo reagisce in modo crociato con umano, topo e ratto; verificare la reattività crociata nella propria matrice specifica, poiché l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno influenza il rilevamento.
• Le applicazioni includono WB, IP, IF-P (immunofluorescenza su paraffina) ed ELISA; ottimizzare empiricamente le diluizioni e le condizioni per ogni saggio.
• Poiché LEF1 è un fattore di trascrizione nucleare, l'estrazione nucleare o la fissazione con paraformaldeide possono migliorare il rilevamento negli esperimenti di IP e IF-P.

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