Anticorpo monoclonale di coniglio anti-LEF1 per WB, IP, ELISA - Q9UJU2

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di LEF1

• LEF1 è un fattore di trascrizione nucleare che si lega al DNA in modo sequenza-specifico (PubMed:2010090). Svolge un ruolo centrale nella via di segnalazione Wnt. Riferimenti correlati: PMID:2010090
• In associazione con CTNNB1 ed EP300, LEF1 attiva la trascrizione dei geni bersaglio, mentre i membri della famiglia TLE (TLE1–4) agiscono come repressori (PubMed:11266540). Riferimenti correlati: PMID:11266540
• LEF1 regola la funzione dell'enhancer del recettore alfa delle cellule T ed è necessario per la maturazione delle cellule T gamma-delta che esprimono IL17A (PubMed:19653274). Riferimenti correlati: PMID:19653274
• Nel cancro pancreatico, LEF1 attiva MYC e CCND1, promuovendo la proliferazione; un isoforma priva del dominio di legame a CTNNB1 antagonizza la segnalazione Wnt.
• Le funzioni indipendenti da CTNNB1 includono l'attivazione dei promotori della fibronectina e la repressione dei promotori dell'E-caderina, favorendo la migrazione delle cellule tumorali e riducendone l'aggregazione.
• Localizzato prevalentemente nel nucleo, LEF1 è espresso nel timo e sovraespresso nelle biopsie di tumori del colon e del pancreas.
• Le modificazioni post-traduzionali includono fosforilazione e ubiquitinazione; è una fosfoproteina legante il DNA coinvolta nella displasia ectodermica.
• LEF1 regola inoltre positivamente la differenziazione degli odontoblasti e può contribuire alla differenziazione delle cellule ciliate e alla morfogenesi dei follicoli.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot (WB), il peso proteico previsto è di circa 44 kDa; verificare la specificità della banda utilizzando lisati di cellule umane e murine. Si consiglia di utilizzare estratti nucleari per arricchire il segnale di LEF1.
• Nell'immunoprecipitazione (IP), l'immunogeno ricombinante (aa 1-300) è diretto contro la regione N-terminale, pertanto può rilevare più isoforme di LEF1. Confermare l'efficienza di cattura con partner di interazione noti.
• Per l'ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento e utilizzare la proteina ricombinante come standard per generare curve di calibrazione quantitative.
• La reattività crociata tra specie è stata dimostrata per uomo e topo; per altre specie, verificare l'omologia di sequenza prima dell'uso.
• Considerato il ruolo nella segnalazione Wnt, questo anticorpo può essere impiegato per analizzare l'attivazione della via in modelli tumorali; tuttavia, si raccomanda una validazione empirica in ciascun contesto sperimentale.

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