Anticorpo Policlonale Coniglio Anti-Legemoglobina (MtLBs) per WB ed ELISA - P27992/P27993

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Legemoglobina

• La Legemoglobina 6 (anche designata come legemoglobina 2, MtLb2 o MtLBs) è un membro della famiglia delle emoglobine vegetali espresso nei noduli radicali di Medicago truncatula.
• Funziona come trasportatore di ossigeno, legando reversibilmente l'O2 tramite un ferro eme pentacoordinato, facilitando la diffusione dell'ossigeno ai batteroidi proteggendo contemporaneamente la nitrogenasi dall'inattivazione (per analogia).
• Essenziale per la fissazione simbiotica dell'azoto (SNF); agisce anche da tampone per il monossido di azoto e il monossido di carbonio, e promuove la produzione di specie reattive dell'ossigeno (es. H2O2) (per analogia).
• Localizzatosubcellularmente nel citosolo e nel nucleo.
• L'espressione specifica del tessuto è limitata ai noduli radicali.
• Le parole chiave associate alla proteina includono: Citoplasma, Eme, Ferro, Legame di metalli, Nitrazione, Fissazione dell'azoto, Nodulazione, Nucleo, Trasporto dell'ossigeno, Fosfoproteina, Proteoma di riferimento, Trasporto.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blotting, considerare un gel SDS-PAGE al 15% per risolvere la legemoglobina di ~15 kDa; includere marcatori di peso molecolare pre-colorati per una determinazione accurata delle dimensioni.
• Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo per ogni applicazione: le diluizioni di partenza tipiche per WB sono 1:500–1:2000; per ELISA, titolare tra 0,1–2 µg/mL.
• Validare la specificità utilizzando le proteine ricombinanti MtLb2 e MtLb6, poiché è possibile una reattività crociata tra le isoforme della legemoglobina (P27992/P27993).
• L'immunogeno è costituito da due peptidi sintetici; l'anticorpo può rilevare sia la proteina nativa che quella denaturata, ma le condizioni denaturanti possono migliorare l'accessibilità dell'epitopo.
• Per ELISA, utilizzare coniugati peptide-BSA o proteina purificata come antigene di rivestimento; bloccare il legame aspecifico con BSA al 5% o latte scremato.

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