Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Legumain (LGMN) per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q99538

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Legumain

• La Legumain, nota anche come asparaginil endopeptidasi (AEP), è una cisteina proteasi con specificità rigorosa per l'idrolisi dei legami asparaginilici; può anche scindere lentamente i legami aspartilici in condizioni acide. Riferimenti correlati: PMID:23776206
• Svolge un ruolo critico nella presentazione dell'antigene MHC di classe II processando le proteine nel sistema lisosomiale/endosomiale. Riferimenti correlati: PMID:9872320
• Nelle cellule dendritiche a cross-presentazione, la legumain media la presentazione dell'antigene MHC di classe I scindendo e maturando la Perforina-2 (MPEG1), facilitando la traslocazione dell'antigene nel citosol.
• La legumain è necessaria per la normale degradazione proteica lisosomiale nei tubuli prossimali renali e per la degradazione del EGFR internalizzato, regolando così la proliferazione cellulare.
• La proteina si localizza prevalentemente nei lisosomi ed è espressa in modo ubiquitario, con maggiore abbondanza nel rene, nel cuore e nella placenta.
• La legumain è sintetizzata come zimogeno, subisce attivazione autoproteolitica ed esiste in molteplici isoforme attraverso splicing alternativo; contiene ponti disolfuro e siti di glicosilazione N-linked.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 26-288) corrisponde alla proforma della legumain priva del peptide segnale, quindi l'anticorpo può riconoscere sia la proforma (~49 kDa) che l'enzima maturo (~42 kDa) nel Western blot.
• Per il WB, considerare di caricare una quantità adeguata di proteina e di utilizzare agenti di bloccaggio appropriati, poiché la legumain può apparire come una doppietta a causa di differenze di processamento o glicosilazione.
• Nell'IF-P e nell'IHC-P, aspettarsi una colorazione punteggiata, lisosomiale; includere marcatori di organelli per verificarne la localizzazione.
• L'anticorpo reagisce in modo incrociato con la legumain di topo e ratto, consentendo studi comparativi tra specie; tuttavia, validare nel proprio sistema campione poiché i livelli di espressione e il processamento possono variare.

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