Anticorpo policlonale di coniglio anti-LGR4 per WB, IF-P, ELISA - Q9BXB1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di LGR4

• LGR4 (recettore 4 accoppiato a proteine G contenente ripetizioni ricche di leucina), noto anche come GPR48, è un recettore per le R-spondine (RSPO1-4) che potenzia la segnalazione canonica Wnt.
• Il legame delle R-spondine induce l'associazione con i recettori LRP6 fosforilati e Frizzled, attivando l'espressione dei geni bersaglio di Wnt senza l'attivazione delle proteine G eterotrimeriche classiche.
• Svolge ruoli fondamentali nello sviluppo di fegato, reni, intestino, ossa, tratto riproduttivo e occhi; è necessario per la spermatogenesi, il mantenimento delle cellule staminali intestinali e la differenziazione delle cellule di Paneth.
• Regola negativamente l'immunità innata inibendo il riconoscimento dei pattern associato a TLR2/TLR4 e la produzione di citochine pro-infiammatorie.
• È coinvolto nella regolazione circadiana dei lipidi plasmatici, in parte attraverso l'espressione ritmica di MTTP.
• È necessario per il corretto sviluppo dei neuroni GnRH che controllano il rilascio degli ormoni riproduttivi.
• È localizzato sulla membrana cellulare, espresso in diversi tessuti steroidogenici (placenta, ovaio, testicolo, surrene) e anche nel midollo spinale, nella tiroide, nello stomaco, nella trachea, nel cuore, nel pancreas, nei reni, nella prostata e nella milza.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione, fosforilazione e legami disolfuro; appartiene alla famiglia dei GPCR con ripetizioni ricche di leucina.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot (WB), utilizzare condizioni riducenti e denaturanti per rilevare LGR4; il peso molecolare previsto è di 104 kDa, ma la glicosilazione può causare una massa apparente superiore. Validare il risultato con un lisato di controllo positivo ottenuto da tessuti umani, murini o di ratto noti per esprimere LGR4.
• Nell'immunofluorescenza su sezioni incluse in paraffina (IF-P), può essere necessario il recupero antigenico (ad es. tampone citrato, trattamento termico) per un'esposizione ottimale dell'antigene. Considerare la permeabilizzazione con Triton X-100 e il blocco con siero compatibile con la specie ospite dell'anticorpo secondario.
• A causa della natura policlonale, può verificarsi una variabilità tra diversi lotti. Includere controlli negativi appropriati (ad es. linee cellulari con espressione bassa o assente di LGR4) e confermare la specificità mediante blocco con l'immunogeno.
• Per l'ELISA, titolare l'anticorpo e utilizzare un sistema di rilevamento idoneo; la reattività crociata con LGR4 di topo e ratto consente lo sviluppo di test tra specie diverse.

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