Anticorpo policlonale anti-LGR5 per WB, FC, ELISA - O75473

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di LGR5

• LGR5 (recettore 5 accoppiato alle proteine G contenente ripetizioni ricche di leucina), indicato anche come GPR49, GPR67, HG38, FEX o GRP49, è un recettore di membrana multipasso caratterizzato da ripetizioni ricche di leucina e da un dominio a 7 eliche transmembrana.
• Funziona come recettore per le R-spondine (RSPO1–4), potenziando la via canonica di segnalazione Wnt. In seguito al legame con il ligando, LGR5 si associa ai recettori LRP6 fosforilato e Frizzled per attivare l'espressione dei geni bersaglio di Wnt, senza interagire con le proteine G eterotrimeriche.
• LGR5 è un marcatore consolidato delle cellule staminali adulte, in particolare alla base delle cripte intestinali e nel rigonfiamento del follicolo pilifero, ed è essenziale per il mantenimento e lo sviluppo di queste popolazioni di cellule staminali epiteliali.
• A livello subcellulare, LGR5 è localizzato nella membrana cellulare, nell'apparato di Golgi e nella membrana della rete trans-Golgi.
• L'espressione tissutale comprende il muscolo scheletrico, la placenta, il midollo spinale e varie regioni cerebrali. Nel tratto gastrointestinale, LGR5 è espresso specificamente nelle cellule staminali alla base delle cripte della mucosa del colon e dell'intestino tenue. In condizioni premaligne, la sua espressione si estende oltre la base delle cripte ed è sovraespresso nei tumori ovarici, del colon e del fegato.
• Le modifiche post-traduzionali comprendono ponti disolfuro e glicosilazione. Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme e la proteina contiene un peptide segnale per il targeting verso la via secretoria.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide sintetico della regione C-terminale (aa 480–580) di LGR5 umano. Nel Western blot (WB), si consiglia di verificare il rilevamento della proteina a lunghezza intera al peso molecolare previsto di circa 100 kDa (99.998 Da calcolati) in condizioni riducenti.
• Per la citometria a flusso (FC), LGR5 è un recettore della superficie cellulare; utilizzare cellule integre e non permeabilizzate per rilevare l'espressione superficiale. Confermare la colorazione in linee cellulari o tessuti primari con espressione nota di LGR5 (ad es. organoidi intestinali) e includere controlli isotipici.
• Nelle applicazioni ELISA, questo anticorpo policlonale può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento. È riportata una reattività crociata con LGR5 di topo; tuttavia, si raccomanda la validazione nel formato specifico del test.
• Il blocco con il peptide o l'utilizzo di linee cellulari knockout può servire come controllo di specificità per distinguere i segnali specifici da quelli aspecifici in tutte le applicazioni.

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