Anti-LIN28A Coniglio Anticorpo Policlonale per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9H9Z2

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di LIN28A

• LIN28A (Omologo A della proteina lin-28, noto anche come ZCCHC1) è una proteina legante l'RNA conservata caratterizzata da due domini di shock da freddo e due motivi a dito di zinco CCHC, collocandola nella famiglia delle proteine a dito di zinco.
• Funziona come soppressore della biogenesi dei microRNA legando specificamente i pre-miRNA let-7 e altri pre-miRNA su un motivo ad anello terminale 5'-GGAG-3', reclutando così le uridililtransferasi TUT4 e TUT7. L'uridilazione innesca la degradazione e impedisce il processamento da parte di Dicer, cruciale per mantenere la pluripotenza (PubMed:18951094, PubMed:19703396, PubMed:22118463). Riferimenti correlati: PMID:18951094 PMID:19703396 PMID:22118463
• LIN28A agisce come potenziatore della traduzione guidando specifici mRNA (es. IGF2, MYOD1) ai polisomi, aumentando la sintesi proteica e la stabilità degli mRNA, essenziale per la differenziazione del muscolo scheletrico (PubMed:21247876). Riferimenti correlati: PMID:21247876
• Si localizza in più compartimenti subcellulari: citoplasma, reticolo endoplasmatico rugoso, corpi P, granuli di stress e il nucleolo, riflettendo i suoi ruoli diversificati nel metabolismo dell'RNA.
• LIN28A è altamente espresso nelle cellule staminali embrionali, nella placenta e nei testicoli, ed è frequentemente up-regolato nei tumori al seno con sovraespressione di HER2, collegandolo alla staminalità e all'oncogenesi.
• Le modifiche post-traduzionali di LIN28A includono acetilazione e fosforilazione, che possono regolare la sua attività e le interazioni proteiche.
• Inoltre, LIN28A lega e potenzia la traduzione di mRNA che codificano enzimi metabolici come PFKP, PDHA1 e SDHA, aumentando così la glicolisi e la fosforilazione ossidativa per supportare la riparazione tissutale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico mappato sugli amminoacidi 100–209 di LIN28A umana. Data l'alta conservazione della sequenza, è prevista una reattività incrociata con LIN28A murina, coerente con la reattività documentata del prodotto.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di ~23 kDa; utilizzare percentuali di gel appropriate (es. 12–15% SDS‑PAGE) e includere i controlli di caricamento pertinenti.
• Per immunochimica (IHC‑P) e immunofluorescenza (IF/ICC), validare l'anticorpo in tessuti o linee cellulari che esprimono LIN28A (es. cellule staminali embrionali, testicolo). Le condizioni di recupero dell'antigene e le diluizioni dell'anticorpo devono essere ottimizzate empiricamente.
• A causa della sua multilocalizzazione, IF/ICC può rivelare pattern di colorazione citoplasmatica e nucleolare; si consiglia la colorazione simultanea con marcatori di organelli per confermare la specificità.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti deve essere verificata per gli assay quantitativi; considerare l'inclusione di controlli positivi e negativi in ogni esperimento.

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