Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-LIN28B per WB, IP, IHC-P, ELISA - Q6ZN17

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di LIN28B

• LIN28B agisce come soppressore della biogenesi dei microRNA, prendendo di mira specificamente i miRNA della famiglia let-7. Si lega ai trascritti primari di let-7 (pri-let-7) e li sequestra nel nucleolo, proteggendoli dal complesso microprocessore e impedendone la maturazione (PubMed:22118463).
  Riferimenti correlati:
  PMID:22118463
• Questa repressione dell'espressione di let-7 è fondamentale per lo sviluppo normale e aiuta a mantenere la pluripotenza nelle cellule staminali embrionali inibendo i segnali di differenziazione.
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• In caso di sovraespressione, LIN28B può reclutare l'uridililtransferasi ZCCHC11/TUT4 sui trascritti pre-let-7, portando all'uridilazione terminale e alla degradazione dei precursori di miRNA (PubMed:19703396).
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  PMID:19703396
• La proteina contiene due domini a dito di zinco e un dominio shock-freddo, che la classificano come proteina legante l'RNA coinvolta nel silenziamento genico mediato da RNA.
• LIN28B è localizzato prevalentemente nel nucleolo e nel nucleo, ma può anche transitare verso il citoplasma, caratteristica essenziale per la sua funzione nella processazione dei miRNA.
• L'analisi dell'espressione tissutale rivela livelli elevati nella placenta, con espressione più bassa nel testicolo e nel fegato fetale. Nel carcinoma epatocellulare si osservano modelli distinti di espressione delle isoforme.
• Il gene subisce splicing alternativo, producendo almeno due isoforme: l'isoforma 1 promuove la crescita cellulare mentre l'isoforma 2 no, suggerendo una divergenza funzionale.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione; la proteina è identificata come marcatore proteomico e dispone anche di una voce di struttura 3D.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno per questo anticorpo copre gli amminoacidi 1-163 di LIN28B umano, mirando alla regione N-terminale. Questa regione include il dominio shock-freddo ed è conservata tra le isoforme riportate, potenzialmente consentendo la rilevazione sia dell'isoforma 1 che dell'isoforma 2. Si consiglia comunque una validazione nel sistema di campionamento specifico.
• Per Western blot (WB), è attesa una banda di circa 27 kDa. Assicurarsi di effettuare un'estrazione proteica corretta, poiché LIN28B è prevalentemente nucleare e nucleolare; si consiglia l'uso di buffer RIPA o kit di estrazione nucleare per migliorare la solubilità.
• Nell'immunistochimica (IHC-P), è previsto un pattern di colorazione nucleare e nucleolare. Utilizzare metodi appropriati di recupero antigenico e validare la colorazione con tessuti di controllo positivo come la placenta o i tessuti tumorali in cui LIN28B è altamente espresso.
• Per l'immunoprecipitazione (IP), il formato monoclonale di coniglio offre elevata specificità e affinità. Ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo e le condizioni di incubazione per la linea cellulare o il lisato tissutale di interesse.
• Questo anticorpo è validato per campioni umani; la reattività incrociata con altre specie non è stata riportata. I ricercatori devono verificare la reattività se utilizzano campioni non umani.

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