Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-LMAN1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P49257

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di LMAN1

• Codificato dal gene LMAN1, la proteina ERGIC-53 (nota anche come gp58, MR60, o lectina legante il mannosio 1) è una proteina transmembrana di 510 amminoacidi con un peso molecolare previsto di ~57,5 kDa e una banda osservata a circa 54 kDa.
• Funziona come una lectina specifica per il mannosio che probabilmente riconosce residui zuccherini su glicoproteine, glicolipidi o ancore GPI, e partecipa alla selezione e al riciclo delle proteine all'interno della via secretoria precoce.
• Forma un complesso recettore specifico per il carico ER-Golgi con MCFD2, mediando il trasporto in avanti di glicoproteine selezionate (es. fattori della coagulazione V e VIII) dal reticolo endoplasmatico all'apparato di Golgi.
• Espressa in modo ubiquitario nei tessuti umani, in linea con il suo ruolo fondamentale nel traffico intracellulare.
• Localizzazione subcellulare: cicla tra il compartimento intermedio ER-Golgi (ERGIC), l'apparato di Golgi e le membrane del reticolo endoplasmatico.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione e formazione di legami disolfuro; contiene un'elica transmembrana singola e richiede il legame di metalli per una corretta funzione lectinica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno era un frammento ricombinante che copre gli amminoacidi 270–480 di LMAN1 umano (NP_005561.1), corrispondente a una porzione ampia del dominio luminale della proteina; questa regione può presentare epitopi conformazionali favorevoli per il rilevamento di LMAN1 endogeno.
• Per il Western blot (WB), è attesa una banda intorno a 54 kDa in lisati di cellule umane, di topo o di ratto; ottimizzare il caricamento e la diluizione dell'anticorpo utilizzando controlli positivi (es. HeLa o tessuto epatico) noti per esprimere ERGIC-53.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), considerare il recupero dell'antigene con buffer citrato (pH 6,0) e testare su sezioni di tessuto fissate in formalina e incluse in paraffina come fegato, pancreas o colon dove LMAN1 è abbondante.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), utilizzare un passaggio di permeabilizzazione per rilevare la proteina nelle membrane ERGIC/ER/Golgi; una colorazione multipla con marcatori di organelli (es. GM130 per il cis-Golgi) può confermare il caratteristico pattern reticolare perinucleare.
• Nelle applicazioni ELISA, la natura policlonale di questo anticorpo può fornire un'ampia copertura epitopica, ma le condizioni di diluizione e blocco devono essere ottimizzate empiricamente per il formato specifico del saggio.

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