Anticorpo policlonale di coniglio anti-LRPAP1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P30533

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di LRPAP1

• LRPAP1 (proteina 1 associata alla proteina correlata al recettore delle lipoproteine a bassa densità) è nota anche come RAP, alpha-2-MRAP o HBP44 ed è codificata dal gene LRPAP1.
• Funziona come chaperone molecolare per le proteine correlate al recettore delle LDL, regolando la loro attività di legame ai ligandi lungo la via secretoria.
• La proteina è localizzata nel lume del reticolo endoplasmatico rugoso, nel compartimento intermedio RE-Golgi, nell'apparato di Golgi (rete del cis-Golgi e lume), nel lume degli endosomi e sulla superficie cellulare.
• LRPAP1 è una glicoproteina e fosfoproteina e presenta attività di legame all'eparina.
• Le caratteristiche strutturali includono un dominio coiled-coil; la proteina è stata caratterizzata mediante sequenziamento proteico diretto e studi sulla struttura 3D.
• È identificata nelle analisi proteomiche e funge da componente del proteoma di riferimento.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 35-357 di LRPAP1 umano, escludendo il peptide segnale ma contenendo le regioni funzionali principali; questa sequenza è conservata tra uomo, topo e ratto, spiegando la reattività crociata osservata.
• Per il Western blot (WB), prendere in considerazione l'uso di condizioni riducenti e il caricamento di 20-40 µg di lisato proteico totale; il peso molecolare previsto è di 41 kDa, ma la glicosilazione può alterare la migrazione.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), testare il recupero antigenico con tampone citrato (pH 6,0) o tampone EDTA (pH 9,0) e ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), la permeabilizzazione con Triton X-100 allo 0,1-0,3% o saponina e la fissazione con paraformaldeide al 4% sono comuni punti di partenza.
• Per l'ELISA, validare l'anticorpo come reagente di cattura o di rilevazione nella matrice del campione pertinente; le concentrazioni di rivestimento e le condizioni di blocco richiedono un'ottimizzazione empirica.

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