Anticorpo policlonale anti-LRRK1 per WB, ELISA - Q38SD2

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di LRRK1

• LRRK1 (Leucine-rich repeat serine/threonine-protein kinase 1), noto anche come OSMD, RIPK6 o Roco1, è una chinasi multidominio di grandi dimensioni contenente ripetizioni ricche di leucina (LRR), ripetizioni ANK, dominio GTPasi ROC, dominio chinasi e ripetizioni WD40.
• Funziona come una serina/treonina-proteina chinasi che fosforila le proteine RAB, principalmente RAB7A, in modo dipendente dalla proteina chinasi C (PKC), regolando così il traffico delle vescicole intracellulari (PubMed:36040231, PubMed:37558661, PubMed:37857821). Riferimenti correlati: PMID:36040231 PMID:37558661 PMID:37857821
• LRRK1 agisce come un regolatore negativo della massa ossea promuovendo la maturazione degli osteoclasti, collegando la sua attività al rimodellamento osseo e alle malattie metaboliche delle ossa.
• A livello subcellulare, LRRK1 si localizza nel citoplasma e nella membrana cellulare, coerentemente con il suo ruolo nella segnalazione e nel traffico associati alla membrana.
• La proteina contiene siti di legame per ATP e GTP e richiede cazioni bivalenti (Mg²⁺, Mn²⁺) per l'attività enzimatica, ed è soggetta a fosforilazione per la regolazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 10–90) di LRRK1 umano. Questa regione non rientra nel dominio chinasi, pertanto l'anticorpo potrebbe riconoscere sia le forme inattive che quelle attive.
• Per il Western blot, è prevista una banda intorno a 225 kDa. Ottimizzare le condizioni di denaturazione (es. riscaldamento lieve o incubazione a temperatura ambiente) per minimizzare l'aggregazione di questa grande proteina.
• L'ELISA può essere utilizzato per la rilevazione quantitativa; considerare l'abbinamento con un anticorpo di cattura che mira a un epitopo diverso per evitare la competizione.
• La reattività crociata è validata per l'umano; testare in altre specie se necessario, poiché l'omologia di sequenza potrebbe consentire il rilevamento.

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