Anticorpo Policlonale Anti-LRRK2 per WB, IHC-P, ELISA - Q5S007

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di LRRK2

• LRRK2 (proteina chinasi serina/treonina con ripetizioni ricche di leucina 2), nota anche come Dardarin, è una grande proteina multidominio contenente un dominio chinasi, un dominio Roc GTPasi, un dominio COR e ripetizioni WD40. Esibisce sia attività chinasi serina/treonina che attività GTPasi. Riferimenti correlati: PMID:18230735
• LRRK2 fosforila un'ampia gamma di proteine, incluse le GTPasi RAB (RAB3A/B/C/D, RAB5A/B/C, RAB8A/B, RAB10, RAB12, RAB29, RAB35, RAB43), PRDX3, APP e RIPK2, regolando la plasticità neuronale, l'autofagia, l'immunità innata e il traffico vescicolare. Riferimenti correlati: PMID:23395371, PMID:26824392, PMID:28720718, PMID:21850687, PMID:27830463
• Agisce come un regolatore chiave della ciliogenesi primaria fosforilando RAB8A e RAB10, promuovendo così la segnalazione Sonic Hedgehog (SHH) nel cervello. Riferimenti correlati: PMID:29125462, PMID:30398148
• LRRK2 regola positivamente l'autofagia tramite un'attivazione dipendente dal calcio della via di segnalazione CaMKK/AMPK, che coinvolge il rilascio di calcio lisosomiale. Riferimenti correlati: PMID:22012985
• Le mutazioni in LRRK2 sono collegate al morbo di Parkinson familiare e sporadico, rendendolo un bersaglio chiave per la ricerca sulla neurodegenerazione.
• A livello subcellulare, LRRK2 si localizza alle vescicole citoplasmatiche, all'apparato di Golgi, agli endosomi, ai lisosomi, ai mitocondri, alle vescicole sinaptiche, ai fagosomi e al citoscheletro, ed è presente nei corpi cellulari neuronali, negli assoni e nelle dendriti.
• Specificità tissutale: Altamente espresso nel cervello, in particolare nei neuroni piramidali della corteccia visiva, nella substantia nigra pars compacta e nel nucleo caudato e putamen; espresso anche nel cuore, fegato, placenta, polmone, muscolo scheletrico, rene e pancreas (a livello proteico). Riferimenti correlati: PMID:29127255
• LRRK2 è coinvolto nella via di traffico retrogrado dai lisosomi al Golgi, interagendo con RAB29 e il complesso retromero per riciclare proteine come M6PR. Riferimenti correlati: PMID:23395371
• Una volta reclutato da RAB29 ai lisosomi sovraccarichi, LRRK2 fosforila e stabilizza RAB8A e RAB10, promuovendo il rilascio del contenuto lisosomiale e regolando la morfologia lisosomiale tramite EHBP1 ed EHBP1L1. Riferimenti correlati: PMID:30209220, PMID:38227290

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blotting, considerare l'uso di un gel SDS-PAGE al 6-8% e tempi di trasferimento prolungati a causa dell'elevato peso molecolare di LRRK2 (~286 kDa).
• Validare la specificità dell'anticorpo utilizzando lisati cellulari o tessuti con knockout o knockdown di LRRK2, specialmente in modelli di cellule cerebrali o immunitarie.
• Per IHC-P, ottimizzare il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo utilizzando sezioni di cervello umano o roditore note per esprimere LRRK2, come la substantia nigra o la corteccia.
• Nell'ELISA, utilizzare frammenti ricombinanti di LRRK2 o lisati cellulari come antigeni di cattura e considerare il blocco con BSA o caseina per ridurre il background.
• Poiché si tratta di un anticorpo policlonale, essere consapevoli di una potenziale variabilità tra lotti; validare ogni nuovo lotto per la coerenza nella propria applicazione.

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