Anticorpo policlonale anti-LRWD1 per WB, ELISA - Q9UFC0

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di LRWD1

• LRWD1 (proteina 1 contenente ripetizioni ricche di leucina e ripetizioni WD), nota anche come CENP-33 o ORCA, è una proteina specifica del testicolo che agisce come regolatore della cromatina presso centromeri, telomeri e origini della replicazione.
• È necessaria per la transizione del ciclo cellulare G1/S, reclutando e stabilizzando sulla cromatina il complesso di riconoscimento dell'origine (ORC) e consentendo la formazione del complesso di pre-replicazione.
• LRWD1 riconosce una combinazione di metilazione del DNA e marcatori repressivi degli istoni, tra cui H3K9me3, H3K27me3 e H4K20me3, per indirizzare le regioni di eterocromatina.
• La proteina si localizza in diverse strutture cromosomiche: il centromero (incluso il cinetocore), i telomeri e presenta un'associazione citoplasmatica con il centrosoma e il citoscheletro.
• Contiene ripetizioni ricche di leucina e ripetizioni WD, motivi che mediano le interazioni proteina-proteina e sono coerenti con il suo ruolo nel legame alla cromatina e all'ORC.
• LRWD1 è essenziale per il silenziamento delle ripetizioni dei satelliti maggiori, contribuendo al mantenimento dell'eterocromatina e alla stabilità del genoma.
• L'espressione è prevalentemente specifica del testicolo e risulta drasticamente ridotta nei testicoli di pazienti affetti da sindrome delle sole cellule del Sertoli, indicando un ruolo nella spermatogenesi.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione e ubiquitinazione (coniugazione UBL), come identificato mediante proteomica, suggerendo l'esistenza di meccanismi regolatori.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una sequenza compresa tra gli amminoacidi 250-350 di LRWD1 umano; si consiglia di verificare l'accessibilità dell'epitopo nel contesto della proteina nativa rispetto a quello della proteina denaturata per il proprio saggio specifico.
• Per il WB, utilizzare protocolli standard e validare con controlli positivi appropriati (derivati dal testicolo) e controlli negativi, poiché l'espressione di LRWD1 è tessuto-specifica.
• L'ELISA può essere adatto per il rilevamento di peptidi o proteine ricombinanti; eseguire test di reattività crociata con gli ortologhi di topo e ratto se sono previsti studi su più specie.
• A causa della bassa abbondanza e dell'espressione tessuto-specifica di LRWD1, si consiglia di valutare strategie di arricchimento o metodi di rilevamento sensibili.

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