Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-LSD2/KDM1B/AOF1 per WB, ELISA - Q8NB78

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di LSD2/KDM1B/AOF1

• LSD2/KDM1B/AOF1 è una istone demetilasi specifica per la lisina che rimuove specificamente i gruppi mono- e di-metilici dalla lisina 4 dell'istone H3 (H3K4me1/2), agendo così come un corepressore trascrizionale.
• Non mostra attività verso H3K4 tri-metilata, o H3K9, H3K27, H3K36 o H4K20 metilate, dimostrando un'elevata specificità per il substrato.
• L'enzima è richiesto per la metilazione de novo del DNA di un sottoinsieme di geni imprintati durante l'oogenesi, collegandolo alla programmazione epigenetica dello sviluppo.
• La catalisi procede tramite ossidazione FAD-dipendente del substrato, formando un intermedio imminico che viene successivamente idrolizzato.
• Da solo, LSD2 ha un'attività minima sui substrati nucleosomiali; l'associazione con GLYR1 forma un complesso che demetila efficientemente H3K4me sui nucleosomi, facilitando la trascrizione della Pol II attraverso la cromatina. Riferimenti correlati:
  PMID:30970244
• A livello subcellulare, la proteina si localizza nel nucleo ed è associata ai cromosomi, coerentemente con il suo ruolo nella modifica della cromatina.
• La proteina presenta domini a dito di zinco e motivi di legame del FAD, classificandola come regolatore della cromatina e flavoproteina.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione e esistono multiple isoforme dovute allo splicing alternativo.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno mira alla regione N-terminale (aa 1-100); pertanto, le isoforme che mancanti di questa regione o con troncamenti N-terminali potrebbero non essere rilevate. Verificare nei sistemi pertinenti.
• Per il Western blot, si raccomandano gli estratti nucleari per arricchire questa proteina legata alla cromatina. Ottimizzare la diluzione dell'anticorpo utilizzando un controllo positivo, come lisati cellulari HeLa o HEK-293.
• Il peso molecolare atteso è di ~92 kDa. Confermare l'identità della banda con marcatori di peso molecolare appropriati e considerare l'uso di agenti di blocco ottimizzati per fosfo-proteine se si studiano forme fosforilate.
• È stata osservata reattività crociata con campioni umani, di topo e di ratto. Quando si utilizzano campioni di altre specie, eseguire inizialmente esperimenti di validazione.
• Per le applicazioni ELISA, titolare la concentrazione dell'anticorpo e confermare la specificità utilizzando proteine ricombinanti o saggi di blocco peptidico.

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