Anticorpo policlonale anti-LTA4H per WB ed ELISA - P09960

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dell'idrolasi del leucotriene A-4

• L'idrolasi del leucotriene A-4 (LTA4H) è un metalloenzima bifunzionale zinco-dipendente dotato sia di attività idrolasica degli epossidi sia di attività amminopeptidasica (UniProt P09960).
• L'attività idrolasica degli epossidi catalizza la conversione del leucotriene A4 (LTA4) nel mediatore pro-infiammatorio leucotriene B4 (LTB4). Riferimenti correlati: PMID:11917124, PMID:12207002, PMID:15078870
• LTA4H può utilizzare anche LTA5 come substrato, sebbene con minore efficienza, per produrre LTB5. Riferimenti correlati: PMID:2996528
• L'attività amminopeptidasica mostra un'elevata affinità per le arginine N-terminali dei tripeptidi e inattiva il chemoattrattore dei neutrofili Pro-Gly-Pro (PGP) mediante clivaggio, contrastando così l'infiammazione. Riferimenti correlati: PMID:18804029, PMID:20813919, PMID:24591641
• LTA4H è coinvolta nella biosintesi della resolvina E1 e della 18S-resolvina E1 a partire dall'acido eicosapentaenoico, mediatori lipidici dotati di potenti azioni antinfiammatorie e pro-risolutive. Riferimenti correlati: PMID:21206090
• L'enzima è localizzato nel citoplasma ed è espresso in diversi tipi di cellule del sangue, tra cui monociti, linfociti, neutrofili, reticolociti, piastrine e fibroblasti, sia nell'isoforma 1 sia nell'isoforma 2.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione; la proteina è una metalloproteasi zinco-dipendente.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo corrisponde agli amminoacidi 312–611 di LTA4H umano (NP_000886.1), coprendo la regione C-terminale. Questa regione include il dominio catalitico e può riconoscere sia la proteina a lunghezza intera sia potenziali isoforme.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 69 kDa. Si consiglia di utilizzare lisati di cellule intere provenienti da campioni umani o murini ricchi di leucociti (ad esempio cellule mononucleate del sangue periferico) oppure linee cellulari come THP-1 o RAW264.7, note per esprimere LTA4H.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione dopo una validazione interna. Per un ELISA a sandwich volto a rilevare LTA4H solubile nel siero o nel plasma, abbinarlo a un anticorpo monoclonale compatibile, se disponibile.
• Poiché la reattività crociata è indicata per l'uomo e il topo, verificare la reattività con il proprio tipo specifico di campione e valutare l'uso di peptidi bloccanti per confermare la specificità.

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