Anticorpo policlonale di coniglio anti-LY6E per WB, IF/ICC, ELISA - Q16553

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di LY6E

• L'antigene linfocitario 6E (LY6E) è una proteina di superficie cellulare ancorata al GPI appartenente alla superfamiglia del recettore dell'attivatore del plasminogeno di tipo urochinasi/Ly-6, nota anche come RIG-E, SCA-2 e TSA-1.
• Funziona come regolatore della proliferazione, differenziazione e attivazione dei linfociti T modulando la segnalazione del recettore delle cellule T (TCR) attraverso l'interazione con CD3Z/CD247, influenzando la fosforilazione di CD3Z.
• LY6E limita l'ingresso dei coronavirus umani, inclusi SARS-CoV, MERS-CoV e SARS-CoV-2, interferendo con la fusione di membrana mediata dalla proteina spike. Riferimenti correlati: PMID:32641482
• Al contrario, favorisce l'ingresso di diversi altri virus, come HIV-1, virus del Nilo occidentale, virus della dengue e virus Zika, probabilmente potenziando la fusione virus-cellula e facilitando la decapsidazione dopo la fuoriuscita dagli endosomi. Riferimenti correlati: PMID:28130445 PMID:29610346
• LY6E è essenziale per la formazione della placenta, agendo come principale recettore per la sincitina-A e partecipando così alla fusione dello strato sinciziotrofoblastico e alla corretta morfogenesi dei vasi fetali e materni.
• È ampiamente espresso, con livelli predominanti nel fegato, nei reni, nelle ovaie, nella milza e nei leucociti del sangue periferico, e si localizza sulla membrana cellulare tramite un'ancora GPI.
• Le caratteristiche strutturali aggiuntive includono un peptide segnale, ponti disolfuro, glicosilazione e un motivo di ancoraggio GPI, classificandolo come lipoproteina.
• Il precursore non processato ha un peso molecolare previsto di circa 13,5 kDa; la glicoproteina matura ancorata al GPI viene spesso osservata intorno a 14 kDa a causa della glicosilazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione extracellulare N-terminale (amminoacidi 21–101) di LY6E umano, comprendendo la proteina matura prevista dopo il clivaggio del peptide segnale e una porzione del dominio Ly-6/uPAR coinvolto nel legame al ligando.
• Per il Western blot (WB), si prevede una banda specifica a circa 14 kDa; i controlli di deglicosilazione possono aiutare a confermare l'identità della banda qualora compaiano più bande.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, l'anticorpo marca la membrana cellulare; ottimizzare la fissazione e la permeabilizzazione per le proteine di superficie ancorate al GPI.
• Per l'ELISA, utilizzare l'anticorpo per la rilevazione diretta o indiretta di LY6E ricombinante o di lisati cellulari, con condizioni di rivestimento appropriate.
• La reattività crociata con topo e ratto è confermata; validare parallelamente con controlli positivi e negativi abbinati alla specie.
• Considerato il ruolo di LY6E nell'ingresso virale, valutare saggi funzionali in modelli di infezione o in linee cellulari che sovraesprimono LY6E.

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