Anticorpo policlonale anti-macroH2A.1 per WB, IF/ICC, ELISA - O75367

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di macroH2A.1

• Il macro-H2A.1 è un istone H2A variante che sostituisce l'H2A convenzionale in un sottoinsieme di nucleosomi, dove reprime la trascrizione. I nucleosomi compattano il DNA e ne regolano l'accessibilità per processi quali la riparazione e la replicazione del DNA. Riferimenti correlati: PMID:12718888, PMID:15621527, PMID:16428466, PMID:15897469
• È coinvolto nell'inattivazione stabile del cromosoma X, inibendo il legame di fattori di trascrizione tra cui NF-kappa-B e interferendo con i complessi di rimodellamento SWI/SNF. Riferimenti correlati: PMID:12718888, PMID:16428466
• Inibisce l'acetilazione degli istoni mediata da EP300 e recluta le HDAC di classe I, determinando uno stato della cromatina ipoacetilato. Riferimenti correlati: PMID:16107708, PMID:16428466
• Un'isoforma si lega specificamente alla poli-ADP-ribosio e all'O-acetil-ADP-ribosio, svolgendo un ruolo chiave nel metabolismo del NAD+ mediante il capping delle catene PAR e la limitazione del consumo di NAD+, favorendo così la respirazione mitocondriale. Riferimenti correlati: PMID:15902274, PMID:23022728
• Un'altra isoforma non si lega alla poli-ADP-ribosio e reprime invece l'espressione del gene SOD3. Riferimenti correlati: PMID:15902274, PMID:23022728
• È localizzata nel nucleo e nei cromosomi.
• È soggetta a molteplici modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione, metilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che ne regolano le funzioni.
• È ampiamente espressa nei tessuti.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 123–372 della macroH2A.1 umana, comprese le regioni comuni a entrambe le isoforme principali; l'anticorpo policlonale può riconoscere più varianti di splicing. Validare la reattività crociata tra specie nel proprio sistema di campionamento, poiché le sequenze possono variare.
• Per il Western blot (WB), attendersi una banda intorno a 39 kDa; le modificazioni post-traduzionali o le differenze tra isoforme possono produrre bande multiple o spostate. Ottimizzare il blocco e la diluizione dell'anticorpo in base allo specifico lisato.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), si prevede un pattern di colorazione prevalentemente nucleare. Utilizzare protocolli appropriati di fissazione e permeabilizzazione per preservare gli epitopi nucleari.
• Per l'ELISA, prendere in considerazione l'abbinamento con un anticorpo di rilevazione compatibile se si sviluppa un saggio a sandwich; la natura policlonale può offrire un'elevata sensibilità, ma richiede una titolazione accurata.
• L'anticorpo è stato validato dal fornitore per WB, IF/ICC ed ELISA con campioni umani, murini e di ratto; i ricercatori dovrebbero eseguire una validazione indipendente per la propria specifica applicazione.

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