Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-MAD2/MAD2L1 per WB, ELISA - Q13257

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MAD2/MAD2L1

• MAD2/MAD2L1 (proteina 1 simile alla proteina di arresto mitotico 2), nota anche come MAD2A o HSMAD2, è un componente chiave del complesso del checkpoint mitotico (MCC) che garantisce una segregazione cromosomica accurata durante la divisione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:10700282, PMID:11804586, PMID:15024386
• Il MCC, composto da MAD2L1, CDC20, BUB1B/BUBR1 e BUB3, si lega e inibisce il complesso promuovi anafase/ciclosoma (APC/C), ritardando la transizione da metafase a anafase fino a quando tutti i cromosomi non sono correttamente attaccati al fuso mitotico. Riferimenti correlati: PMID:15020684, PMID:27509861
• Dopo aver soddisfatto il punto di controllo dell'assemblaggio del fuso mitotico, il complesso MCC-APC/C recluta l'enzima E2 UBCH10, innescando l'auto-ubiquitinazione e la degradazione di CDC20, che riattiva l'APC/C per l'inizio dell'anafase. Riferimenti correlati: PMID:27509861
• MAD2L1 esiste in due conformazioni: aperta (O-MAD2) e chiusa (C-MAD2). Presso i cinetocori non attaccati, C-MAD2 forma un eterotetramero con MAD1L1, che recluta le molecole O-MAD2 e catalizza la loro conversione nella forma attiva C-MAD2. Riferimenti correlati: PMID:29162720
• La proteina si localizza nel nucleo, in particolare ai cinetocori sui cromosomi condensati, nonché nel citoplasma e ai poli del fuso durante la mitosi.
• Le parole chiave associate a MAD2L1 includono acetilazione, fosforilazione e splicing alternativo, indicando modifiche post-traduzionali e diversità di isoforme che possono regolare le sue funzioni di checkpoint.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è stato generato contro un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 70-150 della MAD2L1 umana. Questa regione può essere accessibile sia nella conformazione aperta che in quella chiusa, ma si raccomanda una validazione empirica nei sistemi di campionamento pertinenti.
• Le applicazioni idonee indicate includono Western blotting (WB) e ELISA. Per il WB, si consiglia di utilizzare un controllo di carica non regolato dal ciclo cellulare e ottimizzare le condizioni di bloccaggio per minimizzare il segnale di fondo.
• Data la localizzazione dinamica e i cambiamenti conformazionali di MAD2L1 durante la mitosi, le tecniche di sincronizzazione cellulare possono migliorare la rilevazione nelle specifiche fasi del ciclo cellulare.

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