Anticorpo policlonale Anti-MAP1LC3A per WB, IHC-P, ELISA - Q9H492

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MAP1LC3A

• MAP1LC3A è un modificatore simile all'ubiquitina essenziale per la macroautofagia, che partecipa all'allungamento della membrana del fagoforo durante la formazione degli autofagosomi.
  Riferimenti correlati: PMID:20713600, PMID:24290141
• Attraverso l'interazione con il recettore della reticolofagia TEX264, MAP1LC3A guida il rimodellamento dei subdomini del reticolo endoplasmatico in autofagosomi in condizioni di stress nutrizionale, facilitando il ricambio dell'ER tramite degradazione lisosomiale.
  Riferimenti correlati: PMID:31006537, PMID:31006538
• Appartiene alla famiglia ATG8 ed è noto anche come proteina LC3 A correlata all'autofagia, proteina simile alla catena leggera 3 di MAP1 o catena leggera 3A delle proteine associate ai microtubuli 1A/1B (MAP1A/MAP1B LC3 A).
• La proteina si localizza principalmente nelle vescicole citoplasmatiche, sulle membrane degli autofagosomi, nel sistema di membrane endocellulari e nel citoscheletro, in linea con il suo ruolo nel traffico vescicolare e nell'autofagia.
• MAP1LC3A subisce una modificazione post-traduzionale per esporre una glicina C-terminale utile per la coniugazione con la fosfatidiletanolammina (lipidazione) ed è regolata tramite fosforilazione: questo riflette la sua classificazione come lipoproteina e fosfoproteina.
• L'espressione tissutale è massima nel cuore, cervello, fegato, muscolo scheletrico e testicolo, mentre è assente nel timo e nei leucociti del sangue periferico.
• L'impianto alternativo genera più isoforme e la proteina fa parte della via di coniugazione simile all'ubiquitina (coniugazione Ubl), fondamentale per la dinamica della membrana autofagosomiale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per Western blot (WB), si ricorda che MAP1LC3A endogena può essere rilevata come forma non processata di ~14 kDa e come forma lipidata di ~16 kDa; si consiglia di ottimizzare il buffer di lisi, gli inibitori di proteasi e le condizioni del gel per separare entrambe le forme.
• Durante l'esecuzione dell'immunohistochimica (IHC-P), validare i protocolli di fissazione e i metodi di recupero dell'antigene in base al tipo di tessuto; i controlli positivi devono includere tessuti ricchi di autofagia come cuore, cervello o fegato.
• Per le applicazioni ELISA, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale sia per configurazioni di cattura che di rilevazione e, se necessario, valutare la reattività crociata con membri strettamente correlati della famiglia LC3.
• Dato che l'anticorpo presenta reattività crociata con topo e ratto (come specificato), può essere utilizzato in studi su modelli roditori; si consiglia comunque di verificare le prestazioni specie-specifiche nel proprio sistema sperimentale.

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