Anticorpo monoclonale di coniglio anti-MAP1LC3A per WB, IHC-P, ELISA - Q9H492

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MAP1LC3A

• MAP1LC3A, noto anche come LC3A, ATG8E, MAP1ALC3, MAP1BLC3, è un membro della famiglia delle proteine correlate all'autofagia e svolge un ruolo nella formazione degli autofagosomi.
• Come modificatore simile all'ubiquitina, LC3A si coniuga alla fosfatidiletanolammina sulla membrana del fagoforo, promuovendone l'allungamento e la chiusura. (PubMed:20713600, PubMed:24290141) Riferimenti correlati: PMID:20713600 PMID:24290141
• Attraverso l'interazione con il recettore della reticolofagia TEX264, LC3A partecipa al turnover selettivo dei sottodomini del reticolo endoplasmatico sotto stress nutrizionale (ER-fagia). (PubMed:31006537, PubMed:31006538) Riferimenti correlati: PMID:31006537 PMID:31006538
• LC3A si localizza sulle membrane degli autofagosomi, sul citoscheletro e sulle vescicole citoplasmatiche, riflettendo il suo ruolo dinamico nell'autofagia.
• È più abbondante nel cuore, nel cervello, nel fegato, nel muscolo scheletrico e nel testicolo, ma è assente nel timo e nei leucociti del sangue periferico.
• Modifiche post-traduzionali, tra cui lipidazione e fosforilazione, regolano l'associazione di LC3A con la membrana e il flusso autofagico.
• La sottofamiglia GABARAP/GATE-16 agisce in una fase successiva della maturazione dell'autofagosoma, distinta dal ruolo delle LC3 nell'allungamento precoce della membrana. (PubMed:20713600) Riferimenti correlati: PMID:20713600

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una sequenza unica (aa42–121) della LC3A umana, che può conferire specificità per l'isoforma; la reattività crociata con LC3B/C deve essere verificata sperimentalmente.
• Per Western blot, ci si può aspettare una banda a ~14 kDa (LC3A-I) e una banda con migrazione più veloce (LC3A-II); confermare la specificità utilizzando linee cellulari knockout o knockdown tramite siRNA.
• Per IHC-P, prendere in considerazione metodi di recupero dell'antigene (ad es. tampone citrato) e validare la colorazione con appropriati controlli tessili positivi (cuore, cervello) e negativi (timo).
• L'applicazione ELISA può richiedere un'attenta ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e rilevamento; si consiglia il test di reattività crociata contro le isoforme ricombinanti di LC3.

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