Anticorpo Policlonale Anti-MAP1LC3B per WB, ELISA - Q9GZQ8

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di MAP1LC3B

• MAP1LC3B è un modificatore simile all'ubiquitina che si coniuga alle membrane degli autofagosomi, promuovendo l'allungamento della membrana del fagoforo durante la formazione dell'autofagosoma. Riferimenti correlati: PMID:20418806 PMID:23209295 PMID:28017329
• Svolge un ruolo fondamentale nella mitofagia ancorando gli autofagolisosomi alle membrane esterne mitocondriali tramite legame con le ceramidi C-18, facilitando l'eliminazione dei mitocondri danneggiati e regolando la qualità mitocondriale. Riferimenti correlati: PMID:22922758 PMID:23209295 PMID:28017329
• È coinvolto nelle vie dell'autofagia selettiva, inclusa l'errofagia, dove interagisce con il recettore della reticolofagia TEX264 per rimodellare i sottodomini del reticolo endoplasmatico in autofagosomi in condizioni di stress nutrizionale. Riferimenti correlati: PMID:31006537 PMID:31006538
• Promuove la ciliogenesi primaria rimuovendo OFD1 dai satelliti centriolari tramite la via autofagica. Riferimenti correlati: PMID:24089205
• Recluta il cofattore JMY sulle membrane del fagoforo, stimolando la nucleazione dell'actina per supportare la biogenesi degli autofagosomi. Riferimenti correlati: PMID:30420355
• Si localizza sulle membrane degli autofagosomi, sulle membrane mitocondriali e sul citoscheletro, in linea con il suo ruolo nel traffico di membrane e nell'autofagia.
• È più abbondante nel cuore, nel cervello, nel muscolo scheletrico e nel testicolo, con bassa espressione nel fegato.
• È processato e lipidato tramite una via di coniugazione simile all'ubiquitina, legandosi alla fosfatidiletanolammina sugli autofagosomi in formazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-50) della MAP1LC3B umana. Per la western blot (WB), l'anticorpo può rilevare la forma intera e potenzialmente le forme processate all'N-terminale; convalidare i pattern di clivaggio in campioni di autofagia indotta e non indotta.
• In condizioni riducenti, aspettarsi una banda principale a ~14 kDa (LC3-I) e una banda con migrazione più veloce corrispondente alla LC3-II lipidata; si consiglia l'uso di inibitori dell'autofagia (es. clorochina) per distinguerle.
• Per le applicazioni ELISA, eseguire un test con la proteina ricombinante MAP1LC3B o il peptide come controllo positivo; valutare la reattività crociata con altri membri della famiglia LC3 se la specificità è un requisito critico.
• Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di bloccaggio utilizzando lisati di tessuti o cellulari di origine umana o ratto, in base alla reattività crociata riportata.
• Si raccomanda l'inclusione di controlli positivi e negativi dell'autofagia (es. trattamento con rapamicina, cellule knockout per ATG5) per confermare la rilevazione autentica della LC3-II.

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