Anticorpo Monoclonale Anti-MBD3 per WB, IHC-P, ELISA - O95983

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di MBD3

• MBD3 (Proteina dominante di legame al metil-CpG 3) è un componente chiave del complesso NuRD (rimodellamento dei nucleosomi e deacetilasi), che media il rimodellamento della cromatina e la repressione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:12124384, PMID:16428440, PMID:28977666

• A differenza di altre proteine con domini di legame al metil-CpG, MBD3 non si lega direttamente al DNA metilato ma può interagire con dinucleotidi CpG non metilati, contribuendo alla sua specificità funzionale. Riferimenti correlati: PMID:24307175

• MBD3 funge da repressore trascrizionale, svolgendo un ruolo critico nel silencing genico attraverso il reclutamento di istone deacetilasi e DNA metiltransferasi. Riferimenti correlati: PMID:10947852, PMID:18644863

• La proteina è localizzata nel nucleo ed è associata ai cromosomi, coerentemente con il suo ruolo nella dinamica della cromatina.

• MBD3 subisce modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione e ubiquitinazione, che possono regolare la sua attività e le sue interazioni.

• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme di MBD3, potenzialmente diversificando i suoi ruoli funzionali in diversi contesti cellulari.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico della regione N-terminale (aa 1-100), suggerendo un epitopo lineare adatto per Western blot in condizioni denaturanti e possibilmente per IHC-P dopo un appropriato recupero dell'antigene.
• Per WB, considerare l'ottimizzazione della concentrazione dell'anticorpo nell'intervallo 1:500–1:2000 utilizzando un lisato di controllo positivo (es. HeLa, HEK293) e validare con campioni trattati con knockout o siRNA.
• In IHC-P, il recupero dell'epitopo con tampone citrato (pH 6.0) o EDTA (pH 8.0) può essere utile; eseguire un esperimento pilota con tessuti noti positivi e negativi.
• Per ELISA, si consiglia l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento adatto e l'uso di un tampone di blocco compatibile con il formato del test; testare diverse concentrazioni di antigene di rivestimento.
• È stata riportata reattività crociata con mouse e ratto; tuttavia, si consiglia la validazione del singolo lotto nella specie target per applicazioni critiche.

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